普通小麦-滨麦衍生系M13063A-1和M13086A的分子细胞遗传学鉴定

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长时间的人工选择和驯化,使得现代小麦栽培种的遗传多样性变得狭窄,限制了普通小麦改良和育种。研究表明,远缘杂交是拓宽小麦遗传多样性的主要渠道之一。滨麦(Leymus mollis)是普通小麦三级基因源,通过远缘杂交可以将滨麦优异基因转移到普通小麦背景中。本研究使用分子细胞遗传学方法对小麦-滨麦衍生后代M13063A-1和M13086A进行了鉴定。(1)M13063A-1的鉴定和分析细胞学观察结果表明,M13063A-1在有丝分裂中期含有44条染色体,在减数分裂中期Ⅰ含有22个二价体,且同源染色体在减数分裂后期Ⅰ可以均等分离到细胞两极。原位杂交揭示,M13063A-1含有42条普通小麦染色体和1对易位染色体,42条普通小麦染色体是完整的小麦染色体组,易位染色体长臂来自滨麦Ns基因组,易位染色体短臂是小麦的6BS。分子标记分析发现,1个PLUG引物、3个EST引物和2个SSR引物在滨麦和M13063A-1中扩增出了明显的特异性条带,6个引物都定位在普通小麦第六部分同源群,其中4个引物定位于第六部分同源群染色体短臂,结合基因组原位杂交结果,说明M13063A-1携带的滨麦染色体片段是6Ns S。在农艺性状方面,M13063A-1的株高极显著低于亲本7182,穗长极显著短于亲本7182,其它性状无较大差别。在成株期,M13063A-1抗条锈菌生理小种条中31和条中32。因此,M13063A-1是普通小麦-滨麦6BS·6Ns S附加易位系,可以在创制普通小麦新种质、普通小麦育种和改良中发挥作用。(2)M13086A的鉴定和分析细胞学观察结果表明,M13086A的染色体组成为2n=46=23Ⅱ,同源染色体在减数分裂后期Ⅰ可以均等分离到细胞两极,说明M13086A在细胞学上可以稳定遗传。以滨麦基因组DNA为探针在有丝分裂中期进行基因组原位杂交,发现M13086A含有42条普通小麦染色体和4条外源染色体;以滨麦基因组DNA为探针在减数分裂中期Ⅰ进行基因组原位杂交,发现4条外源染色体配对为两个二价体,进一步验证了M13086A的遗传稳定性。用寡核苷酸探针Oligo-p Ta535、Oligo-p Sc119.2进行荧光原位杂交,结果表明42条普通小麦染色体是完整的小麦染色体组;将两对外源染色体的信号模式和前人的研究结果进行对比,发现两对外源染色体分别是滨麦6Ns和7Ns染色体。抗病性鉴定结果表明,M13086A在成株期抗条锈菌生理小种条中31和条中32,且具有白粉病抗性。因此,M13086A是一个附加了滨麦6Ns和7Ns染色体的双重异附加系,在小麦育种中具有应用价值。
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