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目的:本研究拟行体外实验观察ω-3多不饱和脂肪酸的主要成分二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)、二十二碳六烯酸(ducosahexenoic acid, DHA)对人肝癌细胞HepG2增殖、凋亡和SOD、MDA的影响,并初步探讨其分子作用机制。以期为肝癌治疗探索新的途径。方法:以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,进行体外水平的研究。1.采用MTT法测定(1)不同浓度DHA、EPA对人肝癌细胞HepG2细胞存活率的影响。(2)5-FU单用及与不同浓度DHA、EPA合用对人肝癌细胞HepG2的细胞毒性作用。2.免疫荧光染色检测凋亡形态(Hoechst33258染色)。3.流式细胞仪检测细胞凋亡率。4.黄嘌呤氧化酶法测定总SOD活力,TBA法测定MDA含量。结果:1. DHA、EPA对人肝癌细胞HepG2的细胞毒作用。在一定浓度DHA对HepG2细胞的生长有明显的抑制作用(P <0.05),而且随着作用时间延长抑制率增加。24、48、和72h IC5值分别是(160.87±2.13)μg/ml、(82.39±1.76)μg/ml、(70.71±1.52)μg/ml。同样,在一定浓度EPA对HepG2细胞的生长有明显的抑制作用(P <0.01),而且随着作用时间延长抑制率增加。24、48、和72h IC50值分别是(89.09±1.56)μg/ml、(72.68±2.05)μg/ml、(56.4±1.38)μg/ml。2. 5-氟尿嘧啶联用不同浓度DHA、EPA对人肝癌细胞HepG2的细胞毒性作用。本实验采用5-FU(5μg/ml)单用,及其分别和DHA(20、40、60μg/ml)、EPA(20、40、60μg/ml)联用,与5-FU单用组比较,DHA、EPA联用与5-FU单用相比可以明显增加对肝癌细胞HepG2毒性。因此,DHA和EPA有望成为化疗辅助药物。3. EPA和DHA对人肝癌细胞HepG2凋亡的影响。Hochest33258染色显示对照组细胞核较大,表面光滑,较圆,细胞核发蓝色荧光。在EPA和DHA(80μg/ml)分别预处理48h后,细胞核染色密度增高呈半月形,并凝聚在核膜周边,核仁裂解。4.流式细胞仪检测细胞凋亡率。60、80μg/ml DHA作用48h后,HepG2细胞凋亡率分别为6.52%、14.67%。60、80μg/ml EPA作用48h后,HepG2细胞凋亡率分别为12.31%、32.12%,并且随着药物浓度增加凋亡率升高。各浓度差别有统计学意义(P <0.05)。5. EPA和DHA对人肝癌细胞HepG2总SOD活力和MDA含量的影响。各用药组人肝癌细胞HepG2总SOD活力均有明显降低(P <0.05),且80、100μg/ml l浓度组比60μg/ml浓度组EPA或DHA对细胞总SOD活力具有更加明显的降低作用(P <0.05)。用80、100μg/ml l浓度EPA或DHA处理肝癌细胞后,肝癌细胞MDA含量均有明显升高(P <0.05)。结论:1. DHA、EPA在体外能显著抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖。2. DHA、EPA和5-FU联用组与5-FU单用组相比有增效作用。3. DHA、EPA可以诱导人肝癌细胞HepG2凋亡。4. DHA、EPA可能通过影响细胞脂质过氧化来抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,并诱导凋亡。