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研究背景:安宫牛黄丸出自清代吴鞠通《温病条辨》,具有清热解毒、豁痰开窍的功效,主治热病、邪入心包、神昏谵语。安宫牛黄丸治疗急性脑血管病,疗效显著,后遗症相对较轻,是临床上治疗高热惊厥、脑卒中的要药。 朱砂化学成分主要为硫化汞(HgS),《药典》规定朱砂中硫化汞含量不得低于96%。朱砂具有镇惊、催眠、抗惊厥作用。雄黄主要成分为二硫化二砷(As2S2)。《药典》规定雄黄中二硫化二砷含量不得低于90%。雄黄具有抗菌、抗肿瘤作用。 目的:研究病理状态下(外伤性脑水肿),安宫牛黄散中朱砂、雄黄对HSP70、iNOS及细胞因子(TNF-α、IL-1β)的影响,探讨复方中朱砂、雄黄的药理作用机制,为该方的临床应用提供科学依据。 方法:本实验选用外伤性脑水肿动物模型。SD大鼠,雌雄各半,分为8小时组和24小时组,每组又分设6个组:正常组、模型组、模型+朱砂组、模型+雄黄组、模型+安宫牛黄散组(下称整方组)、模型+去朱砂、雄黄的安宫牛黄散组(下称拆方组)。RT-PCR方法测定脑组织中HSP70mRNA含量;化学法测定脑组织中NOS含量;放免法测定血清中细胞因子TNF-α、IL-1β。 结果:造模后8小时,安宫牛黄散整方组与拆方组HSP70mRNA表达均较模型组增高(P<0.05),且整方组诱导HSP70mRNA表达的作用强于拆方组(P<0.05)。 造模后8小时,朱砂组、雄黄组、安宫牛黄散整方组、安宫牛黄散拆方组iNOS表达均较模型组降低(P<0.05)。整方组抑制作用最为显著,与朱砂组、雄黄组及拆方组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。 造模后8小时,雄黄组、整方组、拆方组TNF-α表达较模型组降低(P<0.05)。但整方组与雄黄组、拆方组比较,差异无显著意义(P>0.05)。整方组与拆方组IL-1β表达较模型组降低(P<0.05),但两者之间的差异无显著意义(P>0.05)。 造模后24小时,各组HSP70mRNA、iNOS、TNF-α及IL-1β表达与正常组比较无显著差异。 结论:正常大鼠脑组织中仅有少量HSP70mRNA表达,造模后8小时,HSP70mRNA显著增高;造模后24小时,恢复正常水平。正常大鼠脑组织中iNOS含量极低,脑外伤后8小时,iNOS含量显著增高;24小时,降至基础水平。正常大鼠血清中细胞因子仅有较低水平表达;脑外伤后,TNF-α、IL-1β表达显著增加,伤后8小时仍维持较高水平的表达,外伤后24小时,恢复基础水平。