金线莲降血脂有效部位工艺及质量控制研究

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金线莲(Anoectochilus roxburghi),即花叶开唇兰,属于兰科开唇兰属,是一种多年生的草本植物。金线莲是我国传统的草本药材,具有清热解毒,滋阴祛火,消炎镇痛的功效,对不知原由的肿痛、发烧、止泻、蛇伤等均有显著疗效,且毒副作用小,使用安全。在现代中药研究中,金线莲多用于糖尿病、高血脂症、乙型肝炎等疾病的治疗。随着金线莲研究的深入,金线莲的优良治疗效果日益得到关注,受到广大民众的青睐,具有广阔的开发前景。基于草药金线莲在民间分布范围和应用较广、疗效确切这一实际情况,本研究拟对金线莲中具有降血脂的物质基础部分进行系统的研究;提取纯化有效部位,进行工艺及质量控制研究。制备工艺研究课题根据查阅相关文献的资料,确定本品发挥疗效的主要活性成分为以金线莲苷为主的苷类成分,并运用统计软件对各试验数据进行分析,从而优选出相关的试验参数。提取工艺研究因为金线莲苷极性较大,易溶于水和乙醇,所以决定对提取溶剂进行考察。其次,因为金线莲苷在溶剂中热不稳定,易分解的性质,决定对提取的温度进行考察。最佳提取工艺考察:采用L9(34)正交试验,以金线莲苷提取率为考察指标,考察提取温度、提取时间、加水倍数和提取次数,优化水提工艺条件。结果表明水提最优条件为:加15倍量水,80℃提取3次,每次2小时。纯化工艺研究醇沉工艺考察:因为金线莲水提取物中含有相当多的糖类成分,所以需要经过醇沉工艺进行沉降,去除糖类杂质。以醇沉杂质质量为考察指标,考察乙醇浓度,优化醇沉工艺条件。结果显示醇沉最佳条件为:浸膏浓缩至相对密度为1.13(45℃测),加入乙醇使含醇量为80%,混匀后静置12小时。过柱精制工艺考察:为去除极性较小的杂质和极性较大的糖类杂质,选用两种类型树脂包括DM131大孔吸附树脂、UBK555离子交换树脂进行考察,以干膏中金线莲苷含量为考察指标。结果表明,选用UBK555离子交换树脂能够很好地去除糖类杂质,精制效果较好。质量控制研究采用HPLC-ELSD法对金线莲有效部位中金线莲苷进行定量分析。色谱柱为Hypersil NH2(5μm,4.6×250mm);流动相为乙腈:水(92:8);流速为1.0ml/min;柱温为30℃;蒸发光散射检测器雾化室温度为40℃;氮气压力为350kPa;信号值为7。结果:金线莲苷进样量在0.524~5.24μg范围内,峰面积(A)的对数值InA与相应质量(M)的对数值InM线性关系良好(r=0.99993),平均加样回收率为98.22%,RSD为1.33%。表明本研究所建立的含量测定方法能准确可靠地进行检测,重复性好,为金线莲有效部位的质量控制提供了依据。
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