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目的： 抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome，APS）是以血清抗磷脂抗体(antiphospholipid，aPL)阳性、动静脉血栓形成、习惯性流产、血小板减少和神经精神症状为主要临床特征的一种自身免疫性疾病，其发病机制尚未完全明确。研究表明，aPL具有很强的异质性，β2糖蛋白Ⅰ（β-2-glycoproteinⅠ，β2GPI）是其主要抗原，抗β2GPI抗体(antiβ2GPI-IgG)在致血栓形成过程中发挥了重要作用，antiβ2GPI-IgG与其抗原β2GPI结合形成复合物激活效应细胞表达相关炎症因子参与血栓形成，跨膜蛋白Toll样受体4(Toll-like receptor4，TLR4)及其下游Myd88依赖和TRIF依赖的两条信号通路介导了该过程。本论文利用TLR4正常及TLR4缺陷小鼠，重点探讨了TLR4介导β2GPI/antiβ2GPI-IgG复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞活化，表达相关炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）的作用，以及相关信号分子的激活情况。 方法： (1)体内实验用C3H/HeN（TLR4正常鼠）和C3H/HeJ（TLR4缺陷鼠）腹腔注射antiβ2GPI-IgG建立实验性抗磷脂综合征小鼠模型。提取腹腔巨噬细胞用细胞免疫荧光法(Immunofluorescence，IF)检测其TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平。观察antiβ2GPI-IgG对小鼠腹腔巨噬细胞的激活情况以及TLR4在其中的作用 (2)提取C3H/HeN和C3H/HeJ两种小鼠的腹腔巨噬细胞用β2GPI/antiβ2GPI-IgG复合物进行体外刺激，2h提取细胞总RNA用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR，RT-qPCR)技术检测上述三种炎症因子mRNA表达水平;12h收取细胞培养液上清用Western blot检测炎症因子蛋白分泌水平。 (3)提取两种小鼠的腹腔巨噬细胞用β2GPI/ antiβ2GPI-IgG复合物体外刺激，设置空白对照(Control)和阳性对照（LPS刺激），分别在30 min和60 min收取细胞总蛋白，Western blot技术检测p38 MAPK和NF-κB p65磷酸化表达水平，观察其是否参与TLR4介导的巨噬细胞活化。 结果: (1)体内实验中，antiβ2GPI-IgG（500μg/次）刺激的C3H/HeN小鼠巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6荧光强度显著高于NR-IgG(500μg/次)刺激组和Control组，甚至高于阳性对照组，而C3H/HeJ小鼠经antiβ2GPI-IgG刺激过后巨噬细胞荧光强度减弱，对荧光强度进行统计学分析发现差异有统计学意义(p＜0.05)。 (2)β2GPI(100μg/mL)/antiβ2GPI-IgG(100μg/mL)复合物对小鼠巨噬细胞体外刺激。在mRNA水平β2GPI/antiβ2GPI-IgG复合物诱导的C3H/HeN巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6表达高于空白对照组和C3H/HeJ刺激组(p＜0.05)，其蛋白的分泌水平也发现了相同趋势的显著差异(p＜0.05)。 (3)在小鼠腹腔巨噬细胞中，经过复合物刺激C3H/HeN细胞的p38MAPK和NF-κB p65磷酸化水平均显著高于C3H/HeJ细胞。 结论: (1)与C3H/HeJ小鼠相比，β2GPI/antiβ2GPI-IgG复合物刺激的C3H/HeN腹腔巨噬细胞相关炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达明显增高，表明TLR4在APS炎症机制中发挥重要作用。 (2)β2GPI/antiβ2GPI-IgG复合物对C3H/HeJ小鼠腹腔巨噬细胞的炎性分子表达没有显著促进作用，提示TLR4可能成为APS预防及治疗的靶点。 (3)β2GPI/antiβ2GPI-IgG复合物能够激活C3H/HeN腹腔巨噬细胞p38 MAPK、NF-κB p65，使其磷酸化增强，而对C3H/HeJ激活不明显，说明p38 MAPK、NF-κB p65参与了TLR4介导复合物对小鼠腹腔巨噬细胞的促炎作用。