论文部分内容阅读
胰腺癌是预后较差的消化道恶性肿瘤之一。由于无特异性的临床症状及缺乏灵敏的检测手段，绝大部分患者就诊时已属晚期，失去了手术切除的机会，5年生存率不足5％。近年来，其发病率在国内外均有升高的趋势。和其它肿瘤一样，胰腺癌的发病机制目前仍不明了。新近研究发现，细胞周期调控和凋亡途径的异常参与了多种肿瘤的发生和发展，胰腺癌亦不例外。survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor apoptosis of proteins，IAPs）家族的新成员。它周期性地表达在细胞周期的G2/M期，并通过与细胞有丝分裂纺锤体微管蛋白结合，抑制半胱氨酸蛋白酶3、7（caspase3、7）的活性，从而抑制细胞凋亡。p53是最常见的肿瘤抑制基因，其抑瘤作用的发挥主要是通过转录激活其下游的WAF1基因，阻止视网膜母细胞瘤（retinoblastoma，RB）基因蛋白产物磷酸化，导致细胞周期阻滞或诱发细胞凋亡来实现的。p53基因发生突变或缺失后，该功能丧失，从而促进肿瘤的发生、发展。本课题主要针对细胞周期调控和凋亡途径中的三种蛋白：survivin、P53和P21WAF1，用免疫组化技术检测其在胰腺癌、正常胰腺及良性胰腺疾病中的表达情况，以探讨胰腺癌可能的发病机制，并为其早期诊断和有效的治疗提供一条新思路。 材料与方法： 1．标本取自郑州大学第一、二临床医学院病理科1994-2002年间的存档组织蜡块，临床资料齐全。共有原发性胰腺导管腺癌33例，癌切缘经病理确诊的正常胰腺组织12例，良性胰腺疾病组织10例（急、慢性胰腺炎8例，胰腺囊肿2例）。4um厚连续切片4-5张，分别作H-E和免疫组化染色。 2．用免疫组织化学“过氧化物酶标记的链霉菌-生物素”（streptavidin-peroxidase，郑州大学2003年硕士论文survivin、p53和PZI似F‘在胰腺癌中的表达及其意义 sP）法检测S盯vivin、P53和PZ 1 WAFI蛋白在胰腺癌、正常胰腺组织及良性 胰腺疾病组织中的表达情况。3.统计工具应用SPSS10.。统计分析软件，统计方法采用xZ检验或精确概率法， 取小0.05为显著性检验水准对资料进行分析。结果:1.survivin蛋白的阳性表达部位主要位于细胞浆，呈黄色或棕黄色颗粒状，弥 漫性分布且有异质性。33例胰腺癌中有29例呈S盯vivin阳性表达，其阳性 率为87.88%;显著高于12例正常胰腺组织（牡.67%）（尸<0.05）;而10例良 性胰腺疾病组织中则无1例表达Survivin蛋白，与癌组织比较，差异具有显 著性（尸<0 .05）。但survivin与胰腺癌病理分级、诩M分期及淋巴结转移情 况无关。2.P53蛋白阳性反应物位于细胞核内，呈棕黄色，局灶或弥漫性表达。33例胰 腺癌中有17例表达P犯蛋白，阳性率为51.51%;12例正常胰腺组织及10 例良性胰腺疾病组织中无1例P53阳性表达，与胰腺癌组相比较，具有显著 性差异（尸<（）.（）5）。且P”表达与胰腺癌病理分级、尸fNM分期和淋巴结转移 等临床病理学参数无关（P>（） .05）。3.P21W，\「‘蛋白阳性反应产物位于细胞核和/或细胞浆，为棕黄色或深褐色颗粒， 呈局灶或散在性分布。它在癌组织、正常胰腺组织及良性胰腺疾病组织中的 表达依次增高，阳性率分别为39.39%（13/33）、66.67%（8/12）和90.00%（9/10）。 其中，良性疾病组织与胰腺癌相比较，具有显著性差异（尸<0.05）。P21wAFI 在胰腺癌fNM分期的I一H期表达率为55 .00%（n/20），显著高于111一W期 （1久38%，2/13）（p<（）.（）5）;无淋巴结转移组显著高于淋巴结转移组 （9 .09%二54.抖%）（尸<（）.（）5）;但l，21WAJ了，蛋白表达与胰腺癌病理分级无关 （P>〔）.0苏)。4.Survivin与P”蛋白在胰腺癌中的表达显著相关（尸<0.05），而与P21WA-F‘蛋 白表达之间则无密切相关性;33例胰腺癌中，P53与 P21WAFI共阳性者4例， 共阴性者7例，P53阳性而PZlwA171阴性表达者13例;P53阴性而P21‘ 阳性表达者9例。经统计分析，二者间无密切相关性（尸>0.05）。5.33例胰腺癌中仅有一种蛋白表达者苏例，占15.15%，且仅见于survivin表达;郑州大学2003年硕士论文sIJIvivin、P称和P21叭f‘在胰腺癌中的表达及其意义 有两种蛋白表达者31例（93.93%），且多见于Svv+P53组合;其中，三种 蛋白同时表达者4例，占12.12%。结论:1.Survivin在胰腺癌中的高表达提示其可能与肿瘤的发生有关，是胰腺癌早期 而普遍的事件，有望成为一新的肿瘤标志物应用于临床，协助胰腺癌早期诊 断和靶向性基因治疗2.P分蛋白检测可作为胰腺癌的辅助诊断，对临床鉴别胰腺癌与胰腺炎可能具 有一定的实用价值。3.P21WAf‘表达缺失与胰腺癌的进展有关，可作为胰腺癌恶性程度的指标。4.胰腺癌中可能存在非1巧3依赖性PZI训q表达。5.Survivin、1>53和P21认，AI性在胰腺癌中联合表达，协同作用，多途径参与肿瘤 的发生，其中细胞周期调节紊乱和凋亡抑制可能是细胞癌变的重要机制之