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NSPc1是最近发现的PcG家族成员,到目前为止,关于NSPc1的文献仅有一篇.2001年,Nunes<[6]>等人报道NSPc1基因定位于2p13.1——帕金森疾病(PARK3)的候选基因区域内,其cDNA全长904bp,推导其编码一个具有247个氨基酸的蛋白质,理论分子量为29.2KD,蛋白N端有一个环指结构域(RING finger domain).NSPc1的mRNA在发育早期的神经系统特异的高表达.由于NSPc1与哺乳动物PcG家族中的Mel-18、Bmi-1基因具有较高同源性,且在发育早期的神经系统特异的高表达,故被命名为Nervous System Polycomb-1.前期工作中,我室已从3月人胎脑文库中成功克隆了NSPc1基因.为深入研究该基因在神经系统的发育与疾病过程中可能的作用,我们首先对NSPc1进行了生物信息学分析,比较人和大鼠、小鼠的NSPc1核苷酸序列发现,三者的相似性非常高,但已报道的大鼠核苷酸序列的N端较人和小鼠缺少一段序列,于是我们从大鼠脑组织mRNA的RT-PCR产物中扩增获得了NCBI序列库中尚不完整的大鼠全长Nspc1序列.接着,构建hNSPc1原核表达质粒,用原核表达并经纯化的hNSPc1蛋白免疫新西兰大白兔,得到抗hNSPc1多克隆抗体.应用Western Blot检测hNSPc1蛋白在大鼠、小鼠各组织中的表达情况,并用组织免疫化学方法分析了hNSPc1蛋白在正常大鼠的脑组织中的分布特点.实验结果表明hNSPc1蛋白在大、小鼠的神经系1统相对高表达,在正常大鼠的脑组织中广泛表达.另外,我们应用细胞免疫荧光技术检测了多种哺乳动物细胞系中内源hNSPc1的亚细胞定位.还同时构建了pEGFPN1-hNSPC1融合表达质粒,转染HeLa细胞和SH-SY5Y细胞,观察pEGFPN1-hNSPC1融合蛋白过表达后的亚细胞定位.结果发现hNSPc1主要分布于细胞核中.综上所述,我们分离和克隆了NCBI序列库中尚不完整的大鼠全长Nspc1序列.第一次从蛋白水平描述了hNSPc1在组织与细胞内的分布特点,并发现hNSPc1影响细胞周期,可能是细胞增殖相关因子.为下一步研究hNSPc1在神经系统的发育与疾病过程中可能的作用奠定了基础.