树莓叶片离体再生及植酸酶基因转化的研究

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该实验以树莓6个栽培品种为试材,用叶片作为外植体进行离体培养,建立了树莓无性系B的高频、稳定、快速的离体再生体系.通过实验发现基因型是影响树莓叶片离体再生的主要限制因子.在供试的6个品种中,无性系B的再生能力最强.在合适的培养基中其再生频率可达90﹪以上,平均每叶片的再生芽数可达12.0个.外源激素的种类、浓度及配比是影响树霉叶片离体再生的重要因素.在实验中激素配比BA2.0mg/L+IBA0.1mg/L可获得最高的再生频率和最高的叶片再生芽数.实验中还发现21-30天苗龄的叶片的再生能力最强.MS培养基在供试培养基中是最适合树莓叶片离体再生的基本培养基.持续黑暗和较强的光照(3000Lux)均不利于树莓叶片的离体再生.该研究采用叶盘法对树莓品种B、烟草品种A进行了植酸酶基因的遗传转化,并在筛选培养基中获得再生芽,对其中部分烟草的转化芽进行了PCR检测为阳性,说明植酸酶基因已整合到烟草植物基因组中.但对树莓的再生芽进行PCR检测却为阴性,该文分析了未成功进行转化的几点原因,为今后树莓转基因研究奠定了基础.
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