绵萆薢的质量控制方法研究

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本论文以绵萆薢为研究对象,采用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱对其进行HPLC-UV-MS/MS指纹图谱分析,并对其中部分色谱峰进行了归属;结合超声辅助提取法测定绵萆薢中11种主要皂苷含量,并在正负离子模式下对皂苷的裂解规律进行总结;基于代谢组学,研究绵萆薢与相似药材粉萆薢的差异成分;采用电感耦合等离子体质谱测定绵萆薢中19种无机元素含量,对绵萆薢的质量控制方法进行了初步的研究。具体研究内容如下:  采用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱建立绵萆薢药材的HPLC-UV-MS/MS指纹图谱,初步鉴定部分主要色谱峰。采用四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(Q-Exactive)分析,正、负离子二级扫描。在203nm波长下以薯蓣皂苷为参照物测定了10个不同产地的绵萆薢指纹图谱。按照绵萆薢HPLC指纹图谱共有模式,标定9个共有指纹峰,通过一级精确分子量及二级碎片离子对其进行归属。  采用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱对绵萆薢中11种主要甾体皂苷进行含量测定。利用响应面法优化超声辅助提取法提取绵萆薢多种甾体皂苷,采用Box-Behnken design法优化了十一种皂苷的提取参数。此外,对正负离子模式下11种皂苷的裂解途径及规律进行了研究。该方法简便、准确,为绵萆薢的质量控制提供了方法。  基于植物代谢组学,采用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱研究来自不同产地的绵萆薢和粉萆薢代谢产物的差异。建立主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)模型。本研究结果表明,主成分分析可以准确有效的区分粉萆薢和绵萆薢这两种极为相似的药材;通过正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)模型可以筛选得到对二者分类影响显著的物质,且差异性物质在两种萆薢中的含量具有显著性差异。  建立绵萆薢中19种无机元素的电感耦合等离子体质谱分析方法。方法学结果显示,19种无机元素在1-1000μg/L的线性范围内线性关系良好(r2>0.9983),精密度与重现性的相对标准偏差在7.84%以下,回收率为86.8%~114.2%。该方法准确度高、灵敏度高,可用于分析绵萆薢中无机元素组成及含量测定。
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