【摘 要】
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背景:支气管哮喘是一种慢性气道病,全球哮喘约3.58亿人。不同国别其发病率差异巨大,在中低等收入国家,哮喘发病率持续上升,而在发达国家上升趋势趋于平稳。目前认为环境、基因影响哮喘的发生,且环境的作用更大。近年来有学者开始探寻肠道微生态及肠道菌群与哮喘之间的关系,也有学者探索应用益生菌来预防和治疗哮喘,在哮喘规范治疗的基础上,加用益生菌制剂,取得了良好的治疗效果。比如加用益生菌制剂治疗的哮喘患者其肺
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背景:支气管哮喘是一种慢性气道病,全球哮喘约3.58亿人。不同国别其发病率差异巨大,在中低等收入国家,哮喘发病率持续上升,而在发达国家上升趋势趋于平稳。目前认为环境、基因影响哮喘的发生,且环境的作用更大。近年来有学者开始探寻肠道微生态及肠道菌群与哮喘之间的关系,也有学者探索应用益生菌来预防和治疗哮喘,在哮喘规范治疗的基础上,加用益生菌制剂,取得了良好的治疗效果。比如加用益生菌制剂治疗的哮喘患者其肺功能有较大的改善,临床症状得到了良好的控制。然而也有研究显示益生菌治疗哮喘没有取得显著的效果。可能主要是各实验使用菌株不同、益生菌的剂量等不同导致各研究结果不同。目前较多研究证明哮喘患儿与健康儿童之间肠道菌群存在差异,哮喘患儿肠道内存在明显的肠道菌群失调。但对成人哮喘与正常成人肠道菌群是否存在差别,及差异菌种与临床指标关系的研究尚未报道。目的:通过非细菌培养的高通量测序技术,探寻成人支气管哮喘患者与健康成人之间肠道菌群是否存在差异。进一步研究哮喘患者肠道菌群与TH1/TH2及肺功能等临床指标之间的关系。为益生菌预防和治疗哮喘提供理论依据。方法:应用高通量测序技术,对符合入组标准的河南省人民医院呼吸内科就诊的成人哮喘患者及体检中心体检的健康成人的大便样本测序。测序选取16Sr DNA的V3V4区,利用计算机软件及生物信息学分析方法,将测序得到的结果与基因测序数据库比较,统计每个样本的微生物群落组成结构,及各菌种的相对丰度,对比分析哮喘患者与正常人之间肠道菌群之间是否存在差异。应用ELISA法检测两组人群中能间接反映TH1/TH2平衡状态的特异性细胞因子IFN-r/IL-4的浓度。同时两组人群行肺功能检查,记录两组人群肺功能数据,分析肠道菌群与TH1/TH2平衡及肺功能水平之间的关系。结果:1.研究纳入成人哮喘17人,对照组15人,两组基线资料无差异(P>0.05)。2.与对照组相比哮喘组IL-4升高,IFN-r降低,差异显著(P<0.05),哮喘患者有明显的Th1/Th2失衡。研究发现两组人群IFN-r与FEV1,PEF呈正相关。3.两组样本之间的alpha-多样性指数没有显著差异。采用主成分分析方法,两组样本在门、属、种分类水平上,没有得到明显的聚类,说明两组人群的肠道菌群具有相似的微生物区系特征。4.在门水平上2组样本共包括13个菌门。两组的优势菌门,厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门,哮喘组占比70.85%、14.22%、6.65%,健康对照组依次占比75.60%、11.24%、7.66%。丰度较高的菌门,变形菌门、疣微菌门,哮喘组分别占比,3.97%、3.62%,健康对照组分别占比4.56%、0.61%。在属水平上两组32个样本中共发现137个菌属,其中哮喘组125个菌属,健康对照组116个菌属。布劳特氏菌属Blautia的丰度在两组内均最高。5.两组在属水平上粪杆菌属及梭菌属相对丰度差异显著P<0.05,在种水平多枝梭菌,粪便拟杆菌相对丰度差异显著P<0.05。6.多枝梭菌(Clostridium ramosum)与IFN-r、FEV1、FVC、PEF、MEF75、MEF50、MEF25负相关。相关系数r及P值分别为r=-0.50、P=0.038,r=-0.68、P=0.002,r=-0.58、P=0.014,r=-0.52、P=0.03,r=-0.62、P=0.007,r=-0.66、P=0.003,r=-0.69、P=0.001。结论:1.哮喘患者与健康人之间肠道菌群的多样性及相对丰度没有差异,两组具有相同的微生物区系特征。2.两组样本在属水平上粪杆菌属及梭菌属两组菌群相对丰度差异显著P<0.05。在种水平上多枝梭菌,粪便拟杆菌相对丰度差异显著P<0.05。3.哮喘患者肠道多枝梭菌(Clostridium ramosum),与IFN-r、FEV1、FVC、PEF、MEF75、MEF50、MEF25负相关。进一步推断多枝梭菌(Clostridium ramosum)与哮喘有相关性。
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