草鱼甘露糖受体基因的克隆与表达分析

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甘露糖受体(Mannose receptor, MR)是一个重要的模式识别受体(Pattern recognition receptor, PRR),不仅可以识别微生物表面的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns, PAMPs),在先天性免疫反应中发挥着重要作用,还参与抗原处理和呈递在后天性免疫反应中也扮演着重要角色。然而,MR在人和鼠中的研究较多,在鱼类中的研究却几乎很少。本研究首次克隆得到草鱼(Ctenopharyngodon idella)甘露糖受体基因,命名为gcMR,并利用荧光定量PCR技术检测gcMR mRNA的组织分布,早期胚胎发育时期和嗜水气单胞菌感染后基因的表达情况。获得如下研究结果:1.获得了草鱼gcMR基因的全长cDNA序列(GenBank accession NO.:KF569903)。 gcMR基因cDNA全长5291bp,其中5’UTR为88bp,3’UTR为904bp,开放阅读框(Open reading frame, ORF)为4299bp,编码1432aa。氨基酸结构预测表明gcMR包含一个信号肽,一个富含半胱氨酸区域(cysteine-rich, CR),一个II型纤连蛋白区域(Fibronectin type II, FNII),8个连续的C型凝集素样区域(C-type lectin-like domains, CTLDs),一个跨膜区和一个细胞质尾巴区域。2.胚胎发育时期,gcMR在卵裂期表达量最高。3. gcMR在各组织中均有表达,并且在脾脏和头肾中的表达量较高。4.嗜水气单胞菌感染后,gcMR、IL-1β和TNF-α在肝脏、脾脏、头肾和肠中表达均上调,表明gcMR在抵抗细菌感染的先天性免疫调节反应中扮演着重要角色。
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