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本文采用分光光度法和高效液相色谱法对莽草酸进行定量测定;研究了从八角中提取莽草酸的优化条件;确定了大孔吸附树脂对莽草酸粗提液脱色和阴离子交换树脂纯化莽草酸的工艺条件,具体研究内容及结果如下:
1、采用两种方法对莽草酸进行检测。分光光度法表明:在0~3.2×10-5mol/L的浓度范围内,吸光度与莽草酸浓度之间有良好的线性关系,得到线性回归方程为:Y=0.4405X—0.0068,R2=0.9994。建立了高效液相色谱检测莽草酸的方法,色谱条件为:色谱柱:Scienhome反相C18;流动相:甲醇:0.1%磷酸=5:95(v:v);流速:1.0mL/min;进样量:20μgL;检测器:紫外检测器;检测波长:210nm;柱温:40℃。
2、通过单因素试验、二次回归通用旋转组合设计和统计选优法对从八角中提取莽草酸的条件进行了优化,优化工艺为:超声波辅助提取时间46min,温度83℃,液料比12:1,粒度60目,提取2次,得率为99.33%。
3、通过静态试验对9种大孔吸附树脂进行筛选,结果表明:HPD—100的效果最好。考察了pH值、温度和树脂用量对脱色效果和莽草酸回收率的影响。通过动态试验确定HPD—100树脂对莽草酸粗提液脱色的最佳工艺条件为:温度25℃,上柱液pH值4.0,总固形物含量0.5%,流速4BV/h。此条件下,处理量为25BV时脱色率仍达70%,莽草酸的回收率可达91.2%。研究了HPD—100树脂的再生条件,结果选用70%的乙醇溶液作为再生剂,上柱流速为2BV/h,再生效果较好。
4、通过静态吸附试验对8种阴离子交换树脂进行了筛选,结果表明:701树脂吸附莽草酸效果最好,其等温吸附符合Langmuir等温吸附方程,离子交换过程的控制步骤为颗粒扩散,该离子交换过程为吸热反应,表观活化能Eα为25.6kJ/mol,此离子交换过程的反应速度很快。考察了pH值、流速、莽草酸浓度以及高径比对穿透曲线的影响。上柱的最佳工艺条件为:pH值4.0,流速5BV/h,莽草酸浓度10mg/mL,高径比10:1。选用0.5mol/L的HCl在2BV/h的条件下进行洗脱,莽草酸的回收率达到84.9%。
5、洗脱液经浓缩、重结晶和干燥后得到的产品由高效液相色谱检验可知:莽草酸的纯度为98.3%,总回收率为74.3%。莽草酸标准品与终产品的红外谱图基本一致,可认为二者为同一种物质。