毛囊复合组织移植结合超脉冲CO2激光治疗兔耳增生性瘢痕的实验研究

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目的采用环钻及超脉冲CO2激光在增生性瘢痕表面打孔后移植自体毛囊复合组织,观察新生毛干形成的时间及瘢痕形态学的变化,分析比较CK-15及a-SMA在不同移植方式下的表达情况,探讨毛囊复合组织促进增生性瘢痕转归的可能机制。方法选取新西兰大白兔20只,随机分到4个组:A:正常皮肤组、B:增生性瘢痕对照组、C:环钻打孔毛囊复合组织移植组、D:超脉冲CO2激光打孔毛囊复合组织移植组。将随机纳入B、C、D三组的15只新西兰大白兔建立兔耳增生性瘢痕模型。C、D两组增生性瘢痕表面分别用环钻及超脉冲CO2激光打孔后行自体毛囊复合组织移植。记录每个瘢痕创面愈合所需时间及新生毛干形成时间,收集C、D两组新生毛干形成后第1天、3天、7天、14天的瘢痕组织标本做病理组织切片,行HE染色镜下观察,并采用免疫组化方法检测毛囊干细胞标志物角蛋白-15(CK-15)、毛囊真皮鞘细胞标志物a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达变化。结果1.C、D两组行复合毛囊组织移植后新生毛干形成时间的观察:环钻打孔组新生毛干形成时间为(24.75±1.97)天;超脉冲CO2激光打孔组新生毛干形成时间为(23.30±1.87)天;C、D两组新生毛干形成时间对比具有统计学意义(P=0.02<0.05)。2.HE染色病理组织学观察:A组:正常皮肤组织表皮真皮连接紧密,基底层、颗粒层、棘细胞层及角质层明显,可见毛囊、皮脂腺、汗腺等皮肤附属器,真皮内腺体丰富。胶原呈鲜红色,排列疏松,形态规则。B组:增生性瘢痕组织内仍可见表皮样结构、基底层细胞数量较少,亦存在有少量皮肤附属器。大量成纤维细胞、炎性细胞浸润。胶原纤维排列致密,呈漩涡状,不规整,血管管腔挤压变形。C组:增生性瘢痕组织内可见簇拥成团状毛囊组织及皮脂腺、汗腺,毛囊周围新生血管聚集,血管管径形状规则,胶原纤维束较瘢痕组排列疏松规整,真皮组织层厚度增加,越靠近毛囊基底部胶原排列越疏松。D组:增生性瘢痕组织内毛囊组织排列规则,瘢痕表皮、真皮连接紧密,表皮真皮连接区可见皮钉生成,毛囊间结缔组织及新生血管丰富,血管管径较细,皮脂腺及汗腺清晰可见开口于皮肤表面,真皮胶原束疏松、增粗、变宽,平行于表面,其间分布相同走向的细长纤维细胞,类似于正常真皮组织中的胶原纤维所见。3. 免疫组化染色观察:通过运用环钻及超脉冲CO2激光打孔毛囊复合组织移植新生毛干形成后第1天即可见CK-15及a-SMA阳性细胞的表达,CK-15阳性细胞散在分布于毛囊周围及表皮基底部,a-SMA阳性细胞的表达位置固定且分布于毛囊外层真皮组织。环钻打孔(C组)CK-15阳性细胞表达率在第1天、3天、7天、14天分别为21%、32%、58%、42%;超脉冲CO2激光打孔(D组)CK-15阳性表达率分别为31%、57%、78%、60%。D组强阳性细胞表达率高于C组;环钻打孔(C组)a-SMA强阳性细胞表达率在第1天、3天、7天、14天分别为21%、34%、52%、44%;超脉冲CO2激光打孔组(D组)a-SMA强阳性细胞表达率分别为:39%、69%、83%、63%。D组阳性细胞表达率同样高于C组,运用卡方检验组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.超脉冲CO:激光打孔毛囊复合组织移植后新生毛干形成时间较环钻打孔移植新生毛干形成时间提前。2.毛囊复合组织移植有利于促进增生性瘢痕组织向正常皮肤形态转归。3.超脉冲CO2激光打孔复合毛囊组织移植较环钻打孔移植更有利于促进毛囊干细胞及毛囊真皮鞘细胞的表达。
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