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乙醇高温发酵技术不仅可以解决糖化与发酵温度不协调的问题,而且可以提高设备利用率、降低能耗、提高乙醇产生速率,降低生产成本。本文以筛选自烟叶腐解物中的酵母菌HN-1为研究对象,考察其在纤维乙醇生产工艺中的应用前景。对HN-1进行生理生化及分子生物学鉴定,并对其发酵性能进行初步研究。结果表明:HN-1菌株为东方伊萨酵母,能够利用葡萄糖和果糖,但不能利用木糖。该菌株的最适生长温度为38℃,乙醇发酵的合适温度范围为38℃-45℃,且随着发酵温度的升高,乙醇生成速率加快,发酵时间缩短。38℃乙醇发酵的最适葡萄糖浓度为120 g/L,乙醇产量为58.19 g/L,乙醇产率为0.460 g/g。利用玉米秸秆水解液发酵,乙醇产量为20.74 g/L,乙醇产率为0.468g/g,达葡萄糖理论转化率的91.6%。通过研究甲酸、乙酸、糠醛、5-羟甲基糠醛、乙酰丙酸和香草醛对东方伊萨酵母HN-1乙醇发酵性能的影响,表明几种抑制物均对菌体生长影响显著,甲酸(≥1 g/L)和香草醛(≥0.5 g/L)明显延长菌体生长延滞期;小于8 g/L乙酸可以促进乙醇得率,0.1 g/L 5-羟甲基糠醛降低发酵前期乙醇产生速率,但是几种抑制物对乙醇产量影响均不显著,进一步应用响应面中心组合(CCD)设计,考察抑制物之间的交互作用的影响,结果表明,香草醛对HN-1影响较大,葡萄糖利用率及乙醇产率未受显著影响,交互作用不明显。将该菌株应用于玉米秸秆稀酸水解液乙醇发酵,在总还原糖浓度分别为39.29 g/L、46.08g/L、72.88 g/L时,38℃发酵温度的条件下,比较其与工业用株1308的乙醇发酵性能,东方伊萨酵母乙醇产量均高于1308,且葡萄糖利用速率较快,乙醇高温发酵性能优于1308。为进一步扩大东方伊萨酵母HN-1的应用范围,将其应用于纤维乙醇同步糖化发酵。通过考察发酵温度、固液比、纤维素酶用量及预处理方式来优化同步糖化发酵工艺条件,确定了以蒸汽爆破为预处理方法、固液比1:9、45℃预酶解12h后42℃同步糖化发酵的工艺,同步糖化发酵乙醇产量为10.28 g/L。