抗寄生虫中药复方C研究

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目的:筛选出中药抗寄生虫有效方(复方C),研制出复方C提取物,为抗寄生虫中药新药的研究开发提供参考。方法:①建立以动物Ⅰ为寄主、寄生虫Y的动物模型,利用该模型,建立药效学评价方法,对19种中药方提取物进行杀虫活性筛选。②利用紫外分光光度法建立复方C的化学评价方法,对复方C提取方法、溶媒选择、粉碎度、溶媒用量、提取时间和提取次数这些单因素进行考察,优选出各单因素水平,采用4因素3水平的L9(34)正交设计实验优选出复方C最佳提取工艺,结合生产需求等因素综合评价优选出复方C提取物的制备工艺。③根据不同浓度的复方C提取物对试验动物的进行安全性试验,把试验动物的平均死亡率转换成概率单位,采用Bliss法计算分析试验动物24、48、96 h的的半致死浓度LC50,采用spss13.0软件中的Probit概率单位分析法进行统计。④以二氯甲烷-甲醇-甲酸(93:9:4)为展开剂,对照品溶液点样量为1μl,供试品溶液点样量5μl,显色剂:磷钼酸(10%),采用薄层色谱法对复方C提取物进行定性鉴别。⑤采用以下色谱条件:流动相:甲醇-0.4%磷酸(27:73),色谱柱:Agilent Eclipse Plus C18(4.6×250,5μm),柱温:30℃,检测波长:323nm,检测器:DAD,分析时间:25min,流速:1ml/min,高效液相色谱法对复方C提取物进行含量测定。结果:筛选出中药复方C抗动物Ⅰ寄生虫Y的效果最好。复方C提取物的紫外最大吸收波长是323nm,线性、重现性、稳定性、加样回收率方法学考察均小于2%。复方C提取物制备工艺为:粉碎过60目筛网,选用溶媒Ⅳ,回流法提取3次,每次30min,提取溶媒用量分别为8倍、8倍和6倍。复方C提取物剂量为20mg/L时,对寄生虫Y的杀虫率即可达到100%,96h时试验动物致死浓度为1566.3mg/L。复方C提取物薄层鉴定样品、对照品、对照药材的指示斑点一致,展开清晰,Rf值适中。结论:中药复方C提取物抗动物Ⅰ寄生虫Y安全有效,为新的中药抗寄生虫Y的开发应用提供依据。
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