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第一部分LUNX与CK19在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义背景与目的:由于传统的RT-PCR法只能达到半定量的程度,因此它很难区分正常组织中靶基因的基础表达水平与癌相关组织中增高的表达水平,从而产生假阳性。本实验旨在应用一种定量检测的方法(实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应法,real time fluorescent quantitative RT-PCR,Real-Time RT-PCR)来检测NSCLC癌旁组织及淋巴结中癌细胞,以便对NSCLC术后准确分期及治疗提供准确的理论依据。方法:以LUNX mRNA、CK19 mRNA作为检测标志物,采用Real-TimeRT-PCR方法检测40例经病理诊断为非小细胞肺癌组织及146枚区域性淋巴结组织中LUNX mRNA和CK19 mRNA的表达情况进行定量分析。对照组为11例肺良性病变患者标本及16枚淋巴结。对所有淋巴结进行常规病理切片HE染色,观察转移情况。结果:①癌组织中LUNX mRNA水平明显高于对照组(P＜0.05),但与患者年龄、性别、组织学分型、淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期无关(P＞0.05)。②癌旁组织中LUNX mRNA水平明显高于对照组(P＜0.05),但与患者年龄、性别、组织学分型无关(P＞0.05),与淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期有关(P＜0.05)。③淋巴结组织中CK19 mRNA水平接近对照组(P＞0.05),但与患者年龄、性别、组织学分型及肿瘤大小无关(P＞0.05),与淋巴结转移及TNM分期有关(P＜0.05)。④淋巴结组织中LUNX mRNA水平接近对照组(P＞0.05),与患者年龄、性别、组织学分型无相关性(P＞0.05),但与淋巴结转移、原发灶大小、TNM分期有相关性(P＜0.05)。⑤LUNX mRNA和CK19 mRNA均与患者年龄、性别、组织学分型无关。⑥Real-Time RT-PCR法和常规病理方法检测肺癌淋巴结转移的比较有统计学意义。结论:LUNX mRNA与CK19 mRNA均可作为Real-Time RT-PCR检测肺癌患者癌旁组织、区域性淋巴结微转移的分子标记物,但前者在特异性和敏感性上优于后者。该方法的建立可能有利于提高肺癌淋巴转移的检出率,从而指导临床分期和治疗。第二部分LYVE-1和CD31在非小细胞肺癌中的表达及与肿瘤转移的关系背景与目的:肿瘤的侵袭转移是个复杂多步骤过程,与肿瘤细胞的粘附、新生血管形成和淋巴道转移等有关。非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)的手术原则是保证根治性和提高患者的生存率。近年来,随着一些淋巴管内皮和血管内皮标志物的发现,使得对肿瘤血管淋巴管生成及转移的研究逐渐增多。本实验旨在检测淋巴管内皮细胞特异性标志物LYVE-1和血管内皮细胞标记物CD31在NSCLC中的表达情况,探讨NSCLC与血管淋巴管发生及肿瘤转移的关系。方法:采用EnVision显色系统免疫组化方法检测40例NSCLC癌组织和癌旁组织LYVE-1和CD31的表达。并计数LYVE-1和CD31标记的癌组织及癌旁组织中的微淋巴管(MLVD)和微血管密度(MVD)。结果:NSCLC癌组织中LYVE-1标记的MLVD显著高于正常肺组织和癌旁组织中MLVD,有统计学意义(P＜0.01);癌组织中MLVD在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组比较有显著性差异(P＜0.01);癌组织中MLVDⅠ期+Ⅱ期与Ⅲ期+Ⅳ期比较有统计学意义(P＜0.01);但NSCLC癌组织中MLVD与性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型和分化程度无关(P＞0.05)。NSCLC癌旁组织中CD31标记的MVD显著高于癌组织MVD有统计学意义(P＜0.01);NSCLC癌组织中MVD有淋巴转移组高于无淋巴转移组,比较无相关性(P＞0.05);NSCLC癌组织中MVDⅢ期+Ⅳ期高于Ⅰ期+Ⅱ期,比较无相关性(P＞0.05)。相关性分析统计表明,MLVD/MVD在NSCLC癌周组织中的表达无相关性(r=0.034,P＞0.05)。结论NSCLC中LYVE-1和CD31表达水平可作为判断病情进展和肿瘤转移的指标之一。