siRNA抑制Hp vacA和cagA基因表达体外实验研究

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kary_yeah
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究背景:幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)的发现已彻底地颠覆了人类关于许多种胃肠道疾病的基本理论,使某些胃肠道疾病如慢性、活动性胃炎和消化性溃疡的病因学和治疗学上出现了一场革命,Hp且与胃腺癌和胃粘膜相关性淋巴样组织淋巴瘤(MALT)密切相关,1994年世界卫生组织(WHO)/国际癌症研究机构(IARC)已将Hp列为Ⅰ类致癌因子。目前,已发现Hp的毒力因子有多种,其中细胞毒素相关蛋白(cytotoxinassociatedantigen,CagA)、细胞空泡毒素(vacuolatingcytotoxin,VacA)与Hp致病性有关,也是目前Hp的研究热点。 根除Hp在上述消化道疾病中具有十分重要的意义,但目前根除Hp的治疗方案服药次数多、剂量大,单剂药物根除率低,而使用多联药物费用昂贵、治愈率不高且不能有效阻止Hp的再感染和复发,且耐药菌株的增加也使抗Hp治疗面临越来越复杂的难题。 虽然Hp全菌疫苗有效,特别是在治疗方面具有优势,但有潜在的安全性问题;亚单位疫苗成分明确,具有较好的安全性,但需要安全而强效的粘膜佐剂,要给予足够高的剂量发挥佐剂效力,且不能完全避免腹泻等副作用。虽然有关构建重组疫苗已经做了许多工作,但重组疫苗难以在同一宿主中表达多个抗原,而且很难保证在定居后能稳定表达所有抗原。还有一个危险是机体可能产生针对载体的免疫应答,而预先存在的免疫可以阻止疫苗株的定居。虽然对Hp免疫预防已进行了大量研究并取得了令人瞩目的成果,但仍有大量问需急待解决。 本研究依据RNAi技术原理,国际标准HpNCTC11637菌株和HpNCTC11639菌株为研究对象,设计针对vacA和cagA基因的siRNA片段,观察靶向siRNA能否抑制HpvacA和cagA基因表达并观察Hp培养超滤液对人胃黏膜上皮细胞株(GES-1)的影响。 第一部分:siRNA抑制HpvacA和cagA基因表达体外实验 目的:优化Hp的电转化条件,观察siRNA能否抑制HpvacA和cagA基因表达。 结论:体外实验中,Hp电转化效率与电场强度和脉冲持续时间关系密切;siRNA特异抑制HpvacA和cagA基因表达,且与浓度和时间有关。 第二部分:Hp培养超滤液对GES-1的影响 目的:观察Hp超滤液对GES-1细胞的空泡毒作用和对其增殖、调亡的影响。 结论:体外实验中,Hp超滤液对GES-1细胞有空泡毒作用,且与Hp超滤液浓度有关;siRNA抑制vacA和cagA表达使Hp超滤液对GES-1细胞空泡毒作用消失;Hp超滤液既促进GES-1细胞凋亡,又促进其增殖。
其他文献
<正> 政府办公室作为政府的一个重要窗口,既担负着参与政务、管理事务、综合服务的职责,又是领导的“参谋部”和“左右手”,是政府联系上下、协调左右的“传导神经”。要圆满
期刊
作为胶东文化的腹地,加之特殊的历史文化背景,烟台美术具有显著的地域特征和独特价值.本文以烟台社会和文化为背景,梳理烟台20世纪的美术发展线索,突出有代表性的美术事件和
摘 要: 本文从多元智力理论视角出发,结合艺术类大学英语教学的特点与难点,从艺术类大学英语教学的现状入手,依据艺术类学生的特点,结合多元智力理论和任务型、人性化教学的方法,有针对性地探究了能够发挥艺术类专业学生的主体作用,提高教学质量的教学策略。  关键词: 艺术类 大学英语教学 多元智力理论 任务型教学 人性化教学  一、多元智能理论的提出及内容  美国哈佛大学认知心理学家霍华德·加德纳(How
摘 要: 语言和文化具有相互联系、相互影响的关系,两者密不可分。英语作为一门语言,在一个截然不同的语言环境进行教授,必然会受到本土文化的影响。为了削弱这种影响所产生的负面效果,越来越多的高校选择聘请外教进行教学,力求还原原汁原味的英语课堂。然而,就目前实施效果来看,在引进外教教学这些年中,在英语教学方面,中西方文化对外教的教学产生了一些影响。  关键词: 文化 外教 英语教学  一、引言  不同民
2013年11月25日,习近平总书记在临沂考察时指出:“沂蒙精神与延安精神、井冈山精神、西柏坡精神一样,是党和国家的宝贵精神财富,要不断结合新的时代条件发扬光大.”时隔五年,
期刊
目的 本研究的目的是探讨中国人群中5-HT2C受体基因(HTR2C)Cys23Ser多态性的发生率及其与一般性偏头痛(包括无先兆偏头痛和有先兆偏头痛)的易感性之间的关系。 材料与方法
目的:回顾总结卵巢过度刺激综合征(Ovarian HyperstimulationSyndrome,OHSS)临床特点,为OHSS的临床观察、治疗提供一定依据。  方法:收集自2008年1月至2014年12月期间于河北
摘 要: 在当前教学中,利用多媒体网络技术教学已经较普遍,多媒体网络技术不仅能帮助教师教学,还能促进学生学习。教师应该在教学中利用多媒体网络技术的这些便利之处,为学生的学习和自身的教学服务。作者谈谈多媒体网络技术在大学英语教学中的应用。  关键词: 多媒体网络技术 大学英语 教学作用  随着社会的发展及对教育的投入,教学资源逐渐丰富起来,当前对教育的要求越来越严格,教师不仅要教会学生知识,还要锻炼
背景与目的:角膜新生血管(Corneal Neovascularization,CRNV)是多种因素引起的一种严重的角膜病理改变,目前尚无十分满意的药物即阻止其进展又无副作用。去甲二氢愈创木酸(no
伴随着新课程改革的提出和进一步开展,教育活动中学生的主体地位得到重视,尊重学生的主体地位,不仅要让学生成为课堂的主人,也应致力于通过各种课堂教学活动,让学生的各方面