铁皮石斛多酚对小鼠力竭运动氧化损伤的防护作用

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正常情况下机体内自由基的产生与清除处于一种平衡状态,然而在力竭运动中机体内会产生大量的自由基,平衡状态被打破,造成自由基堆积。残存的自由基会攻击机体生物分子、细胞、腺体和组织等,造成不可逆的破坏,损伤机体并导致疾病和衰老。为保持力竭运动中自由基产生和清除的平衡,机体需要摄入一些必需的抗氧化剂,来增强抗氧化酶活性,提高机体清除自由基的能力。而植物多酚作为绿色、天然、无毒且高效的抗氧化剂,成为本实验研究的首选。铁皮石斛是一种珍贵的中药材具有增强免疫力,滋阴补虚、补脾胃、保肝护胆、强筋补骨,降血糖,抑制肿瘤的功效。铁皮石斛中含有多种有效成分,其中多酚类物质具有良好的抗氧化效果,可以增强机体抗氧化酶活性,提高清除自由基的能力。因此,机体在运动训练前补充铁皮石斛多酚可以有效延长运动时间,提高运动能力;亦可以在运动训练后补充铁皮石斛多酚,及时清除机体内高强度力竭运动训练产生的自由基,防止自由基带来的氧化损伤。目的:本实验采用铁皮石斛多酚,在运动训练前每只实验小鼠灌胃200 mg/kg铁皮石斛多酚提取物。经过为期四周的运动训练,测定各组小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量。以此来反映铁皮石斛多酚提取物对力竭运动小鼠的抗氧化作用,为运动训练后选择健康有效的天然抗氧化剂饮品,用于运动保健和运动康复,缓解运动疲劳,提高运动能力做健康指导。方法:本研究选取铁皮石斛采集于济南港基花卉“梅园精品一号”采用鼓风干燥技术,干燥的铁皮石斛经过粉碎,过筛,保存备用。铁皮石斛多酚提取采用超声辅助和热浴回流并用,乙醇做提取溶剂。原提取液经过旋转蒸馏浓缩,冷冻干燥保护各物质分子结构的完整性。采用没食子酸标准品测定提取物中多酚含量为103.5mg/g,芦丁标准品测定提取物中多酚黄酮的含量为24.8 mg/g。由山东中医药大学动物实验中心购买90只健康雄性昆明种小鼠。根据《中国药典》推荐每人每天的铁皮石斛用量为6-12 g,按成人体60 kg及最低用量(6g)计算,铁皮石斛用量应为100.00 mg/kg·d和预实验药剂量设计条件50、100、200、300、500 mg/kg的摸索,确定实验小鼠最终灌胃剂量为200 mg/kg。参考相关文献,第一周小鼠每天游泳运动训练量30 min,第二周运动训练量60 min,第三周运动训练量90 min,第四周运动训练量120 min以及最后一次游泳运动至力竭。采用眼球取血方式宰杀小鼠收集血液,并分离血清。由酶免试剂公司提供elisa试剂盒,并根据试剂盒严格要求,认真操作,酶标分析仪测定吸光度,绘制标准曲线图,得出回归方程计算酶含量。结果:SOD酶:PL组小鼠血清SOD值明显高于NC组,非常显著性差异,且P<0.001。PL组小鼠血清SOD含量高于PC组,有极显著性差异,P<0.01。N-S组小鼠血清中SOD含量显著高于NC组,有极显著性差异,且P<0.01。P-S组小鼠血清SOD含量高于PC组,P<0.01,有极显著性差异。CAT酶:PC组小鼠血清中CAT的含量明显高于NC组,非常显著性差异,且P<0.001。PL组小鼠血清中CAT的含量明显高于NC组,非常显著性差异,且P<0.001。PC组和PL组小鼠血清中CAT的含量相比,无显著性差异,且P>0.05。P-S组的小鼠血清CAT含量显著高于N-S组,非常显著性差异,且P<0.001。N-S组CAT含量显著高于NC组,非常明显差异性,且P<0.001。P-S组CAT含量显著高于PC组,P<0.01极显著性差异。GSH-Px酶:PC组小鼠血清GSH-Px酶含量高于NC组,P<0.001非常显著性差异。PL组小鼠血清GSH-Px酶含量显著高于NC组,P<0.01极显著性差异。PC组小鼠血清中GSH-Px酶含量值与PL组相比较,无显著性差异,P>0.05。N-S组小鼠血清GSH-Px酶含量显著高于NC组,P<0.001非常显著性差异。P-S组小鼠血清GSH-Px酶含量显著高于PC组,P<0.01极显著性差异。Vc力竭运动组24小时后小鼠血清GSH-Px酶含量高于PC组,P<0.05,显著性差异。MDA含量:N-S组小鼠血清丙二醛的含量与NC相比,N-S组小鼠血清丙二醛含量高于NC组,极显著性差异,且P<0.01。PC组小鼠血清丙二醛含量高于NC组,显著性差异,且P<0.05。PL组小鼠血清丙二醛含量高于NC组,非常显著性差异,且P<0.001。N-S组小鼠血清丙二醛含量高于NC组,极显著性差异,且P<0.01。结论:铁皮石斛多酚显著地提高了小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,增强了小鼠运动能力,延长了游泳运动时间。但是,4周运动训练和最后一次力竭运动并没有降低抗氧化酶的含量,运动训练反而增加抗氧化酶含量。因此,实验结果表明补充铁皮石斛多酚和游泳运动训练都增强了小鼠体内抗氧化能力。
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