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本文采用传统的病毒分离鉴定方法和单抗夹心ELISA方法相结合,建立了二步法检测方法,对大批量鸡泄殖腔棉拭样品进行新城疫病毒检测,并与传统方法进行了比较研究,试验分两部分。 试验一,用SPF鸡胚将送检的免疫鸡群泄殖腔棉拭样品盲传一代,再用新城疫单抗夹心ELISA对F1代尿囊液进行新城疫病毒(NDV)快速检测,同时用世界动物卫生组织(OIE)推荐的NDV分离及鉴定的方法加以验证。通过对3423份样品的检测,检出阳性样品453份,阴性样品2959份,可疑样品11份,两种方法的阳性符合率为99.3%,阴性符合率为99.7%。对全部阳性样品进行病毒分离,经血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验证明均含有新城疫病毒(NDV),再将全部阳性样品分离物进一步作毒力鉴定,结果有强毒力株、中等毒力株及弱毒力株,因此用传统加快速的二步法检测免疫鸡群泄殖腔棉拭样品新城疫病毒快速、准确率高,呈阳性者不一定全是NDV强毒力株感染,也可能是NDV中等毒力株或弱毒力株感染。 试验二,采用传统的病毒分离的方法将免疫鸡群泄殖腔棉拭样品盲传一代,再用新城疫单抗夹心ELISA对F1代尿囊液进行新城疫病毒(NDV)检测。结果表明传统加快速的二步法检测方法具有良好的特异性,NDV阳性样品检出率很高,且鸡禽流感病毒(AIV)对此无干扰作用;分别检测阳性样品453份、阴性样品2959份,与动物世界卫生组织(OIE)推荐的病毒分离及鉴定、毒力试验的经典检测方法相比较,符合率为99.3%、99.7%;测定的变异系数为8%,稳定性较好,同时二步法比经典的检测方法缩短检测时间7d。结果表明用传统加快速的二步法检测免疫鸡群泄殖腔棉拭样品新城疫病毒实用、准确、特异、稳定、快速。