【摘 要】
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目的探讨安罗替尼对胃癌细胞生物学特性的影响及其可能的分子机制。方法使用CCK-8法检测安罗替尼对胃癌细胞生长增殖能力的影响。使用划痕实验和Transwell实验检测安罗替尼对胃癌细胞迁移和侵袭能力影响。使用Hoechst 33342荧光染色法检测胃癌细胞的凋亡情况。使用TRIzol提取细胞总RNA,进行转录组测序。基因差异表达分析使用DESeq2程序包,通路分析和功能富集使用cluster Pro
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目的探讨安罗替尼对胃癌细胞生物学特性的影响及其可能的分子机制。方法使用CCK-8法检测安罗替尼对胃癌细胞生长增殖能力的影响。使用划痕实验和Transwell实验检测安罗替尼对胃癌细胞迁移和侵袭能力影响。使用Hoechst 33342荧光染色法检测胃癌细胞的凋亡情况。使用TRIzol提取细胞总RNA,进行转录组测序。基因差异表达分析使用DESeq2程序包,通路分析和功能富集使用cluster Profiler包;使用Cytohubba插件的MCC算法寻找关键互作蛋白;使用r MATS软件进行可变剪切分析。结果安罗替尼可显著抑制胃癌细胞的生长增殖能力,且该抑制作用具有剂量和时间依赖性。Transwell和划痕实验结果显示安罗替尼抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力。凋亡荧光染色结果显示,经安罗替尼处理的胃癌细胞有更多具有染色荧光加强、核染色质浓缩特征的凋亡细胞。对安罗替尼处理后的胃癌细胞进行转录组分析,发现安罗替尼致1549个基因发生差异表达（275个上调,1274个下调）。GO分析结果显示,安罗替尼影响的生物学过程包括甾醇生物合成过程、胆固醇生物合成、二次醇生物合成等;安罗替尼影响的细胞组分包括核染色体动粒凝聚、微绒毛细胞顶端等。KEGG通路富集分析提示,安罗替尼影响细胞周期和花生四烯酸代谢、类固醇生物合成等通路。对经安罗替尼处理后的差异表达基因进行蛋白相互作用网络分析,结果显示CDC20、CCNB1、STK6、PTTG1、HMMR、KIF20A、CEP55、DLGAP5、PLK1和CKS2作用关系最密切;当基因发生可变剪切时可能会影响代谢途径、溶酶体等途径。在差异表达基因中,安罗替尼的靶基因PDGFRB表达水平下降,进一步分析显示,该基因表达与胃癌病理分期显著相关,而且该基因在胃癌中的高表达不利于胃癌患者预后。结论安罗替尼抑制胃癌细胞BGC-823的增殖、迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡;安罗替尼可能通过调控相关基因的表达以及相关作用通路实现胃癌中的抗肿瘤作用。图13幅;表6个;参142篇。
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