本文以石刁柏品种UC800为材料，建立了石刁柏的细胞液体培养体系；对比了用不同的方法诱导多倍体效果；筛选出高产细胞系的培养方法，并对发酵液中的L-天冬酰胺酶的提取进行了初步探索。其主要结果概述如下： 1．建立了石刁柏的细胞液体培养体系： a．比较了酶解法和愈伤组织悬浮培养法获得单细胞的效果，同等条件下，愈伤组织悬浮培养法得到的细胞相对少，但形状圆而均一，活力和质量都比酶解法好。 b．通过对细胞液体培养条件的研究，确定了细胞培养条件为：MS+35 g／l蔗糖+4 mg／L NAA+0.5 mg／L6-BA、接种量为2.0×10~4个／ml细胞、转速为90r／min、pH为5.8、温度为28℃；在培养的第7-9d细胞活力最旺盛的时期；细胞团的形成培养基为MS+30g蔗糖+4mg／LNAA+0.5mg／LKT+0.5mg／L6-BA。 2．多倍体诱导的最佳效果： 在多倍体诱导时，同步化条件为4℃处理36 h，恢复培养12 h，在此处理条件下细胞的分裂指数最高，可达76％0；在此基础上固体混培法处理条件为：秋水仙碱0.05％、DMSO 4％，加倍率为20.8％。液体混培法处理条件为：秋水仙素0.05％、DMSO 4％，加倍率为22.9％。 3．石刁柏细胞中L-天冬酰胺酶发酵体系的建立 在石刁柏细胞培养的基础上，确定其最佳产酶条件为：培养基为MS+35g／L蔗糖+3 mg／LNAA+0.01 mg／L6-BA、pH值为6.4、温度为27℃、转速为110r／min、接种量为5.0×10~4个／ml。以此为基础筛选了石刁柏高产细胞系(Aspβ)，分析了其产酶动力学：L-天冬酰胺酶发酵液酶活力的峰值可达到19.80 U／ml、产酶稳定期持续7～8 d。并依此，利用吴氏提取工艺得到回收率为30.8％，纯化倍数为9.85，比活力为0.55 U／mg的L-天冬酰胺酶。