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目的:通过病例对照研究检测和分析胆汁酸外转运蛋白BSEP、MRP2、MDR3在肝移植术后并发肝内胆汁淤积患者肝组织中的表达,探讨胆汁酸代谢在肝移植术后肝内胆汁淤积发生和发展中作用。方法:以肝移植术后伴有重度黄疸的肝功能异常的患者为研究对象,收集行肝穿刺活检患者的临床资料及肝脏穿刺活检组织的蜡块,进行组织学及相关蛋白的免疫组织化学检查。其中病例组23例,根据临床表现、肝功、肝组织学检查将病例组分为胆汁淤积组(13例)和非胆汁淤积组(10例);以同期18例血管瘤患者瘤旁正常肝组织为对照组,应用免疫组织化学方法检测BSEP、MRP2、MDR3在病例组和对照组肝组织中的表达,采取半定量分析的方法,对比观察上述胆汁酸外转运蛋白在对照组、胆汁淤积组与非胆汁淤积组中的表达差异,探讨胆汁酸外转运蛋白与肝功生化指标之间的相关性。结果:1.一般资料:胆汁淤积组、非胆汁淤积组与对照组性别、年龄相比无统计学差异(χ~2=5.546,P=0.062,t=0.172,P=0.842),胆汁淤积组与非胆汁淤积组移植术后出现肝功异常的时间比较无差异(Z=-0.558,P=0.577)。2.胆汁淤积组、非胆汁淤积组与正常对照组肝功指标对比统计分析:胆汁淤积组与非胆汁淤积组ALT(107.8(61.5,174.0)vs 142.0(32.0,616.8),χ~2=23.248,P<0.001)、AST(116.0(55.5,164.0)vs 126.0(61.5,249.8),χ~2=27.186,P<0.001)、TBIL(192.1(163.6,300.15)vs 294.2(223.7,522.7),χ~2=30.997,P<0.001)、DBIL(135.4(92.1,234.3)vs 159.9(119.9,258.2),χ~2=29.912,P<0.001)、ALP(291.0(138.5,457.0)vs 126.0(99.3,194.5),χ~2=26.783,P<0.001)、GGT(351.0(202.5,446.5)vs 149.0(69.8,297.3),χ~2=29.434,P<0.001)肝功能指标相比无统计学意义,但两组上述指标分别与正常对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。3.正常对照组肝脏病理可见肝小叶结构清晰可见,胞质丰富,肝细胞排列规则,核居中;胆汁淤积组和非胆汁淤积组肝脏病理则见到肝小叶结构紊乱,肝细胞显著水肿变性,肝细胞淤胆,小泡性脂肪变性。核偏位,散在点状坏死。4.肝组织BSEP、MRP2、MDR3的表达:⑴BSEP:在正常对照组BSEP高度表达100%,胆汁淤积组和非胆汁淤积组表达率均降低,强度减弱,与对照组相比表达差异均有统计学意义(P<0.001,P=0.011),但胆汁淤积组与非胆汁淤积组之间差异无统计学意义(P=0.371)。⑵MRP2:在正常对照组呈强阳性表达,表达率100%,胆汁淤积组和非胆汁淤积组MRP2表达强度稍下降,但三者间的表达对比分析,差异无统计学意义(χ~2=4.065,P=0.131);⑶MDR3:在正常对照组MDR3呈强阳性表达,表达率100%,而胆汁淤积组和非胆汁淤积组MDR3表达下降,与对照组相比表达差异均有统计学意义(P=0.001,P=0.021),但胆汁淤积组与非胆汁淤积组之间差异无统计学意义(P=0.504)。5.BSEP、MRP2、MDR3与肝功指标的相关性:病例组的肝组织中BSEP、MRP2、MDR3表达量与ALT、AST、ALP、GGT、TBIL、DBIL之间无相关性。仅发现在胆汁淤积组中MDR3与GGT呈一定的正相关(r=0.585,r~2=0.340,P=0.036);BSEP与AST呈一定的负相关(r=-0.559,r~2=0.312,P=0.047)。结论:1.肝移植术后伴有重度黄疸的肝功异常患者胆汁酸外排转运蛋白BSEP、MDR3蛋白表达均有所下调,MRP2表达无显著下调。2.本研究未发现胆汁酸外排转运蛋白BSEP、MRP2和MDR3表达异常与肝移植术后肝内胆汁淤积的发生有明确的相关性。该类患者发生肝内胆汁淤积分子机制仍需进一步研究。3.胆汁酸转运蛋白BSEP与主要存在于线粒体内的AST负相关,提示BSEP低表达可能与肝细胞坏死有关,MDR3表达与胆系酶谱GGT正相关提示MDR3表达上调可能与胆管细胞增生,GGT释放增加有关。