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目的：选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合抗癫痫药物(Anti-epileptic drugs， AEDs)卡马西平治疗难治性癫痫(Refractoryepilepsy，RE)模型大鼠，研究联合应用对难治性癫痫大鼠胃窦粘膜、肾脏组织、血液凝血功能、心肌损伤标志物肌钙蛋白T(cTnT)值的影响，探讨塞来昔布联合卡马西平治疗难治性癫痫大鼠时，对大鼠靶器官的毒副作用，为临床安全用药提供动物实验依据。方法：1、实验分组：本实验共设立7个实验组，即假手术组，海人酸手术组，难治性癫痫大鼠生理盐水对照组(生理盐水组)、难治性癫痫大鼠卡马西平治疗组(卡马西平治疗组)、难治性癫痫大鼠塞来昔布治疗组(塞来昔布治疗组)、难治性癫痫大鼠卡马西平联合常规剂量塞来昔布治疗组(联合治疗组)、难治性癫痫大鼠卡马西平联合大剂量塞来昔布治疗组(大剂量联合治疗组)。2、建立难治性癫痫模型：a、癫痫模型的建立：采用海人酸海马区快速点燃方法建立癫痫大鼠模型，即将海人酸(Kainic Acid，KA)1.5μg(1μg/μl)定点注入Wistar雄性大鼠右侧海马CA3区，海马CA3区和额窦区安装电极。手术后一部分归入海人酸手术组，其余术后大鼠按Racine分级法观察大鼠痫性发作行为，同时检测各大鼠脑电图。在术后0.5-6小时内若大鼠出现Ⅳ级及以上的痫性行为，并且脑电图异常，表示癫痫模型建立成功。b、难治性癫痫模型的建立：将筛选出的癫痫模型大鼠，给予卡马西平(125mg/kg)灌胃,每日1次，连续灌胃28天后，观察大鼠行为并监测脑电图，若大鼠仍有痫性行为发作并且脑电图异常，表明难治性癫痫模型建立成功。c、假手术组：将等量的生理盐水(1.5μl)注入大鼠右侧海马CA3区，海马CA3区和额窦区均安装电极。3、难治性癫痫模型标准：a、卡马西平筛选28天后大鼠的痫性行为，按照Racine分级观察：0级:正常；Ⅰ级:面部痉挛抽动，包括动须、眨眼、节律性咀嚼；Ⅱ级:Ⅰ级加节律性点头；Ⅲ级:Ⅱ级加前肢或后肢痉挛；Ⅳ级:站立并伴两侧前肢阵挛；Ⅴ级:持续站立、倾倒、失平衡。发作达到Ⅰ级及以上即为行为异常。b、卡马西平筛选28天后脑电图：正常大鼠的脑电图频率为5～12Hz，波幅20～80μV，出现高幅尖波、棘波等异常波形可作为癫痫诊断依据。c、同时出现行为异常和脑电图异常表明难治性癫痫模型造模成功。4、药物治疗：7个实验组分别给予相应的药物治疗28天。5、检测指标：治疗28天后处死各组大鼠，取大鼠胃窦粘膜及肾脏组织制作病理切片，心脏采血检测大鼠凝血功能指标，即国际标准化比值(International normalized ratio，INR)，心肌损伤标志物肌钙蛋白T(cTnT)。结果：1、塞来昔布治疗组、卡马西平治疗组、联合治疗组与生理盐水组相比，胃窦粘膜病理学改变发生率均为0，无统计学差异；大剂量联合治疗组与生理盐水组相比(p=0.485，p>0.05)，差异无统计学意义。结果表明卡马西平联合塞来昔布，卡马西平联合大剂量塞来昔布对难治性癫痫大鼠胃窦粘膜无影响。2、卡马西平治疗组与生理盐水组肾脏组织病变率均为0，无统计学差异；塞来昔布治疗组与生理盐水组肾脏组织病变率相比（p=1.00，p>0.05），差异无统计学意义；联合治疗组与生理盐水组肾脏组织病变率相比(p=1.00，p>0.05)，差异无统计学意义；大剂量联合治疗组与生理盐水组肾脏组织病变率相比(p=0.485，p>0.05)，差异无统计学意义。结果表明卡马西平联合塞来昔布，卡马西平联合大剂量塞来昔布在治疗难治性癫痫大鼠时，对大鼠肾脏组织无影响。3、联合治疗组与生理盐水组血液INR值相比(p=0.179，p>0.05)，差异无统计学意义；大剂量联合治疗组与生理盐水组INR值相比(p=0.212，p>0.05)，差异无统计学意义。结果表明卡马西平联合塞来昔布，卡马西平联合大剂量塞来昔布在治疗难治性癫痫大鼠时，对大鼠凝血功能无影响。4、海人酸手术组与假手术组相比，cTnT值明显升高，有显著性差异(p=0.00，p<0.05），差异有统计学意义，提示采用海人酸海马区快速点燃方法制作癫痫模型，并且未给予大鼠抗癫痫药物治疗时，增加了大鼠心肌细胞的损伤；联合治疗组与生理盐水组cTnT值相比(p=0.000，p<0.05)、大剂量联合治疗组与生理盐水组cTnT值相比(p=0.000，p<0.05)，cTnT均明显降低，差异有统计学意义；大剂量联合治疗组与联合治疗组cTnT值相比(p=0.000，p<0.05)，cTnT明显降低，差异有统计学意义。结果表明卡马西平联合塞来昔布，卡马西平联合大剂量塞来昔布在治疗难治性癫痫大鼠时，均降低了大鼠心肌损伤标志物cTnT值，表明联合治疗对大鼠心肌细胞没有产生进一步的毒副作用。结论：选择性COX-2抑制剂塞来昔布联合抗癫痫药物卡马西平治疗难治性癫痫模型大鼠时，对大鼠胃窦粘膜、肾脏组织、凝血功能、心肌细胞均无毒副作用。