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本文旨在研究胰高血糖素样肽-2(Glucagons-like peptide-2, GLP-2)对离体培养的断奶仔猪空肠上皮紧密连接相关蛋白基因表达的影响以及GLP-2调控紧密连接可能的分子机制,探讨GLP-2影响肠道黏膜屏障功能的基本规律以及可能的作用机理。将断奶仔猪空肠组织块置于含0、1×10-8、1×10-7mol/L的GLP-2的细胞培养液中进行培养,考察不同GLP-2添加水平对断奶仔猪空肠上皮紧密连接ZO-1、Occludin和Claudin-1基因表达的影响,并考察添加GLP-2是否会促进MAPK经典信号通路关键激酶ERK1/2和p90RSK的磷酸化。待确定出GLP-2能有效促进紧密连接相关蛋白基因表达的剂量后,再向培养液中添加MEK1/2特异性抑制剂U0126,考察阻断MAPK经典通路后紧密连接ZO-1、Occludin和Claudin-1基因表达的变化,并使用免疫组化技术考察上述三种蛋白在组织中的分布变化。将空肠组织块置于含1×10-8mol/L和1×10-7mol/L的GLP-2培养72h后能够显著提高断奶仔猪肠上皮紧密连接关键蛋白mRNA和蛋白表达。当GLP-2的添加水平为1×10-8mol/L时,与对照组相比,ZO-1、Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量分别增加29.0%、54.0%和120.0%(P<0.05),蛋白相对表达量分别增加35.6%、30.4%和26.2%(P<0.05)；当GLP-2的添加水平为1×10-7mol/L时,ZO-1、Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量分别增加59.0%、142.0%和251.0%,蛋白相对表达量较对照组增加46.7%、56.7%和35.6%(P<0.05)。与此同时,添加1×10-8mol/L和1×10-7mol/L的GLP-2均能显著的促进ERK1/2、p90RSK的磷酸化水平。当GLP-2的添加水平为1×10-8mol/L时,磷酸化形式的ERK1/2和p90RSK的蛋白相对表达量分别较对照组增加34.7%和56.0%(、(P<0.05)；当GLP-2的添加浓度为1×10-7mol/L时,磷酸化形式的ERK1/2和p90RSK的蛋白相对表达量分别比对照组增加了69.5%and84.0%(P<0.05)。而向1×10-7mol/L的GLP-2组添加U0126阻断MAPK信号通路后,紧密连接ZO-1、Occludin和Claudin-1mRNA相对表达量与GLP-2添加组(1×10-7mol/L)相比分别下降74%、85.1%和87.7%(P<0.05),紧密连接ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白相对表达量与GLP-2添加组(1×10-7mol/L)相比分别下降17.2%、24.6%和12.6%(P<0.05)。免疫组化发现：添加1×10-7mol/L的GLP-2培养肠组织块72h与对照组(GLP-20mol/L)相比能够促进紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1在组织和细胞中连续分布,光密度分析也显示添加GLP-2后上述三种蛋白的光密度值较对照组增加18.6%、40.6%和27.6%(P<0.05)；添加10μmol/L的抑制剂后发现紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1在组织和细胞中分布的连续性减弱,光密度值也较GLP-2处理组(1×10-7mol/L)显著下降9.80%、28.6%和16.2%(P<0.05)。GLP-2能够促进断奶仔猪空肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1基因和蛋白表达,并改善ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白在组织中的分布,而MAPK经典通路可能是GLP-2调控肠道紧密连接蛋白的重要信号通路之一