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本文主要研究了不同浓度的重金属铅(0、0.3、4.8、76.8mg/kg)对甜菜夜蛾连续五个世代生长发育的影响,并克隆了与生殖相关的甜菜夜蛾卵黄原蛋白基因,分别测定了铅胁迫下雌、雄虫幼虫、蛹和成虫三个阶段卵黄原蛋白的相对表达量。结果如下:(1)在不同浓度的铅胁迫下,甜菜夜蛾连续五代的雌雄比、生殖腺指数、产卵量、卵孵化率均受到不同程度的影响。在高浓度(76.8mg/kg)铅胁迫下,甜菜夜蛾第3代雌雄比显著高于对照处理,雌蛾所占比例达到60%左右,但到第4-5代,与对照组相比又无显著差异;在较高浓度(4.8mg/kg)铅处理组中,甜菜夜蛾第4代雌雄比显著高于对照组,雌蛾所占比例高达64%左右,但第5代又显著下降并与对照无显著差异;而在低浓度(0.3mg/kg)铅处理组中,连续五代与对照相比雌雄比均无显著差异。表明在一定时间内,高浓度的铅处理有使甜菜夜蛾雌性化倾向,但随着时间延长,影响逐渐消失。在低浓度(0.3mg/kg)铅胁迫下,甜菜夜蛾第1代雌蛾的生殖腺指数比对照组高出14%,单雌产卵量也显著高于对照,比对照多80粒左右,但到第4-5代时,甜菜夜蛾雌蛾的生殖腺指数和单雌产卵量均显著低于对照;而高浓度(768mg/kg)铅处理均显著降低了甜菜夜蛾雌蛾的生殖腺指数并抑制了产卵。结果表明,铅胁迫后,甜菜夜蛾的单雌产卵量和生殖腺指数趋势一致:均表现为短时间内低浓度(0.3mg/kg)铅处理促使甜菜夜蛾雌蛾卵巢增重,促进产卵,但随着世代延续仍抑制卵巢发育以及产卵,高浓度(76.8mg/kg)铅处理至始至终抑制卵巢发育以及产卵。在铅浓度为(4.8mg/kg和0.3mg/kg)处理组中,甜菜夜蛾从第2代开始卵孵率显著低于对照;在高浓度(76.8mg/kg)铅处理组中,甜菜夜蛾连续五代的卵孵率均显著低于对照,第5代时,卵的孵化率甚至不及对照的50%。表明在铅的胁迫下,甜菜夜蛾卵的孵化率随铅浓度的上升和世代的延续呈线性下降。(2)采用RACE技术克隆出了甜菜夜蛾卵黄原蛋白基因的cDNA全长(已提交GenBank:KT274176)。该基因全长为5612bp,自556bp至5340bp为其开放阅读框,起始密码子为ATG,终止密码子为TAA,一共编码1761个氨基酸,相对分子量为200.47kDa,等电点pl为8.71。通过同源性比对,甜菜夜蛾卵黄原蛋白与斜纹夜蛾(Spodoptera litura)同源性最高,为88%;与棉铃虫(Helicoverpa armige ra)的同源性为74%,与粘虫(Mythimna separata)的同源性为73%。(3)铅胁迫对甜菜夜蛾各发育阶段卵黄原蛋白(Vg)的相对表达量影响不一在甜菜夜蛾幼虫阶段:在较低浓度(03 mg/kg和4.8 mg/kg)处理组中,自第3代始,5龄雌虫Vg基因的表达量显著低于对照;在高浓度(76.8mg/kg)铅处理组中,5龄雌虫的Vg基因表达量五个世代(除第2代外)均显著低于对照,表明甜菜夜蛾5龄雌虫Vg基因的表达量随铅浓度的增加和世代的延续而下调。甜菜夜蛾5龄雄虫Vg基因的的表达量虽然相对雌性是较低的水平,但在(0.3mg/kg、4.8 mg/kg、76.8mg/kg)3个浓度梯度处理组中,分别在第5代、第3-5代、第2-4代5龄雄虫Vg基因的表达量显著高于对照,表明铅胁迫诱导了甜菜夜蛾5龄雄虫Vg基因的表达并且表达量随着世代的延续和铅处理浓度的增加而上调。在甜菜夜蛾蛹期阶段:在低浓度(0.3mg/kg)铅处理组中,第4-5代,雌蛹Vg基因的表达量显著低于对照;在高浓度(4.8mg/kg、76.8mg/kg)铅处理组中,分别在第3-5代、第3代雌蛹Vg基因的表达量显著高于对照,表明低浓度铅处理下调雌蛹Vg基因表达水平,而高浓度的铅处理上调雌蛹Vg基因的表达水平。在(0.3mg/kg、4.8 mg/kg、76.8mg/kg)3个浓度梯度处理组中,分别在第3-5代、第3-5代、第2-5代雄蛹Vg基因的表达量显著低于对照,三种浓度铅胁迫均下调了雄蛹Vg基因的表达量。在甜菜夜蛾成虫阶段:在(0.3mg/kg、4.8mg/kg、76.8mg/kg)3个浓度梯度处理组中,分别在第4-5代、第3-5代、第2-5代雌性甜菜夜蛾Vg基因的表达量显著低于对照,铅胁迫后总体下调了雌性甜菜夜蛾Vg基因的表达量。在高浓度(76.8mg/kg)处理组中,雄蛾Vg基因的表达量在五个世代间均显著增加;在较高浓度(4.8mg/kg)铅处理组,第5代Vg基因的表达量显著高于对照,即使低浓度(0.3mg/kg)铅处理组,虽与对照相比无显著差异,但也上调了Vg基因的表达量,表明铅胁迫后总体上调了雄性甜菜夜蛾Vg基因的表达量。