农药的合理使用能有效地提高农产品的产量,促进了农业经济的发展。噻呋酰胺是一种作用广泛的含氟杀菌剂,可有效防治谷物,水果,蔬菜中的多种病害。尽管噻呋酰胺是一种低毒农药,它的残留情况却依然不容忽视。随着农业生产活动中对噻呋酰胺的需求量加大的同时,人们在日常生活中与之接触的风险也在逐渐升高,使人类健康受到威胁。农药残留情况一直是人们关注的焦点,也是食品安全问题中急需解决的重点。现有的噻呋酰胺残留的检测方法仅仅局限于高效液相色谱法(HPLC),气相色谱法(GC)等化学检测方法,此类方法不仅操作复杂,耗时耗力,而且无法摆脱对大型仪器和专业操作人员的依赖,因此有必要建立一种更为方便、迅速、灵敏、仪器要求不高的方法来对噻呋酰胺的残留进行有效检测,酶联免疫吸附分析方法(ELISA)则合此要求。本研究以2-甲基-4-三氟甲基-5-噻唑甲酸为半抗原,采用活泼酯法、混合酸酐法、CDI/DMAP 法合成了 免疫原 Hapten-1-BSA 和包被原 Hapten-1-OVA-1、Hapten-1-OVA-2、Hapten-1-OVA-3;以2,6-二溴-4-三氟甲氧基苯胺为半抗原,采用重氮法合成了免疫原Hapten-2-BSA和包被原Hapten-2-OVA。用合成的两种免疫原免疫雌性Balb/c小鼠,获得两种不同的噻呋酰胺多克隆抗体,建立了两种噻呋酰胺残留的间接竞争ELISA (ic-ELISA)检测方法。结果表明,所有人工抗原经紫外吸收光谱扫描和SDS-PAGE鉴定合成成功,免疫小鼠后获得了两种不同的噻呋酰胺多克隆抗体。其中,以PAb-1和Hapten-1-OVA-3建立了 ELISA-1,对噻呋酰胺的IC50为1.39 mg/L,最低检测限(LOD)为0.074 mg/L;以 PAb-2 和 Hapten-2-OVA 建立了 ELISA-2,对噻呋酰胺的 IC50 为 1.96 mg/L, LOD为0.082 mg/L。交叉反应实验结果表明两种抗体对噻呋酰胺都具有较高的特异性,与其它类似物无交叉反应。添加回收实验结果显示,两种ELISA方法的回收率较好。与HPLC法相比,ELISA方法具有较低的检测限量,较高的灵敏度。本研究建立的噻呋酰胺残留的两种ELISA检测方法具有一定的应用范围,可实现环境水样及小麦等农产品中噻呋酰胺残留的快速检测。此外,本研究也为噻呋酰胺单克隆抗体的制备提供有效的技术支撑,从而为建立更加完善,灵敏的单克隆抗体免疫分析方法提供参考。