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目的探讨HBV促进HLJ1基因转录水平表达的机制,揭示HBV与肝癌迁徙发生的新机制,为HCC的治疗提供新的思路。方法1. RT-PCR和Real-time PCR方法检测HLJ1在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞mRNA水平的表达差异。2. HBV表达质粒(pCH-9/3091)转染到HepG2细胞中,RT-PCR和Real-time PCR方法检测HLJ1在HepG2细胞中mRNA水平的表达。3.构建HLJ1启动子全长及各区段的虫荧光素酶报告质粒,HLJ1启动子全长的萤火虫荧光素酶报告质粒与HBV表达质粒(pCH-9/3091),及内参质粒共转染HepG2细胞,利用双荧光素酶报告基因检测系统,检测HLJ1启动子荧光素酶活性。将HLJ1启动子全长的萤火萤火虫荧光素酶报告质粒分别转染到HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中,检测HLJ1启动子荧光素酶活性。4. HLJ1启动子全长及各区段的虫荧光素酶报告质粒与HBV表达质粒(pCH-9/3091)及内参质粒共转染HepG2细胞,利用双荧光素酶报告质粒检测系统,检测HLJ1启动子荧光素酶活性。5.构建YY1siRNA-1、YY1siRNA-2及YY1siRNA-3干扰质粒,分别与HLJ1启动子各区段萤火虫荧光素酶报告质粒、pCH-9/3091及内参质粒共转染HepG2细胞,利用双荧光素酶报告基因检测系统,检测相对荧光素酶活性。6. YY1siRNA-2干扰质粒转染到HepG2.2.15细胞中,RT-PCR和Real-time PCR方法检测HLJ1和YY1在HepG2.2.15细胞中mRNA水平的表达。结果1. Real-time PCR与RT-PCR结果显示HLJ1在HepG2.2.15细胞中的表达较在HepG2细胞中有明显地增加。HepG2细胞转染入pCH-9/3091后,HLJ1的表达较无关对照有明显地增加。2.成功构建了HLJ1各区段的启动子虫荧光素酶报告质粒,且HLJ1全长启动子虫荧光素酶报告质粒与pCH-9/3091共转染组的相对荧光素酶活性较其对照组有明显地增加。HLJ1启动子在HepG2.2.15细胞中的相对活性明显高于在HepG2细胞中的活性。3. HBV对含有YY1结合位点的HLJ1的启动子活性有明显的促进作用,对没有YY1结合位点的HLJ1启动子的活性没有显著的促进作用。4.将转录因子YY1的干扰质粒与pCH-9/3091和pGL3-HLJ1-P共转染到HepG2细胞中,发现能够明显的抑制HBV对HLJ1启动子的促进作用。HepG2.2.15中干扰内源YY1的表达,HLJ1的表达也随之下降。结论在HepG2细胞中,HBV能通过促进HLJ1启动子活性进而增强HLJ1转录水平的表达,这一过程是通过转录因子YY1介导的。本研究探讨了HBV对HLJ1表达的调节机制,为HBV的生物学作用提供了新的思路。