三阴性乳腺癌（Triple negative breast cancer,TNBC）是指ER、PR及HER2均为阴性的乳腺癌,三阴性乳腺癌在亚洲人群乳腺癌中比例约12%～17%,预后差,复发及死亡风险高,由于目前仍缺乏针对该表型的分子靶点,临床除了化疗几乎无更有效的治疗方案。根据临床统计,转移性TNBC患者5年生存率低于30%,TNBC患者的临床治疗效果差,针对该亚型患者的治疗仍是目前临床所面临的一个难题。因此,寻找一种对于TNBC治疗行之有效的药物或方案可以满足临床需求,给TNBC患者带来生的希望,具有良好的治疗学意义。白藜芦醇是一种天然的植物多酚类化合物,具有广泛的生物学活性。近年来,多个研究报道白藜芦醇具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节、神经保护等作用。前期的研究发现,白藜芦醇非整倍体小分子化合物Diptoindonesin G可以作为选择性雌激素受体（estrogen receptor,ER）调节剂来治疗乳腺癌,也可以通过诱导急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）细胞的分化来发挥其抗AML特性。本研究旨在评价Dip G对TNBC的拮抗作用,并探究抑制TNBC的新机制,为TNBC的治疗提供新思路。在第一章中,我们对本论文涉及到的几个主要研究对象进行了比较系统的梳理,包括白藜芦醇、白藜芦醇寡聚体以及Dip G的研究状况;三阴性乳腺癌及其治疗的研究现状;GABARAPL1基因的作用和研究进展。在第二章中,我们确定了Dip G具有促进TNBC细胞由基底样B细胞亚型向管腔样细胞亚型分化的独特生物活性。首先,我们运用台盼蓝染色计数法、克隆集落形成和Ed U掺入实验发现,Dip G可以浓度和时间依赖性地抑制TNBC细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、SUM1315的细胞增殖。并借用小分子抑制剂发现,Dip G对于TNBC细胞的增殖抑制作用不依赖于细胞凋亡、坏死和自噬机制。接着,我们通过流式细胞术、western blot、q PCR、油红染色等实验发现,Dip G能够诱导TNBC细胞形态向管腔样细胞转变,促使细胞粘附分子表达增多和中性脂滴生成,同时削弱侵袭能力,降低TNBC细胞的干性,提示Dip G可能通过诱导TNBC细胞分化来发挥其增殖抑制作用。最后,通过转录组测序分析发现,Dip G处理组中79.2%基底样B乳腺癌标记基因表达下调,而36%管腔样乳腺癌标记基因表达上调。GSEA基因富集分析也表明Dip G可以促进基因特征群由基底样B乳腺癌向管腔样乳腺癌转化。在第三章中,我们探讨了Dip G促TNBC细胞分化的分子机制。通过转录组测序结果比对,我们筛选到Dip G促AML分化和促TNBC分化过程中显著共同上调基因GABARAPL1。Dip G可以显著提高TNBC细胞中GABARAPL1的基因和蛋白水平,并且呈现浓度和时间依赖性。使用si RNA敲低GABARAPL1之后,Dip G对TNBC细胞的增殖抑制作用和促分化作用均大幅度减弱。由于Dip G、GABARAPL1与ER间的关系,我们检测了Dip G处理后TNBC细胞中ER的变化,结果发现Dip G可以下调ERα编码基因ESR1的转录,同时又上调ERβ编码基因ESR2的转录。敲低ESR2后Dip G上调GABARAPL1的作用消失。GABARAPL1启动子上游含有ERE元件,Ch IP实验结果发现Dip G促进ERβ招募至ERE,这些说明Dip G是通过诱导TNBC细胞中ESR2的表达,转录激活GABARAPL1,从而促使细胞分化。在第四章中,我们借助TNBC异种移植瘤模型考察Dip G的治疗作用。结果发现,Dip G在体内也可抑制TNBC肿瘤的增长,促使肿瘤细胞分化,抑制了肿瘤的肺转移。Dip G与他莫昔芬联用后效果更佳,这对三阴性乳腺癌的治疗方向有很好的指示意义。综上所述,在本研究中,我们发现Dip G可以抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖和侵袭,促进其向管腔样乳腺癌亚型转化。进一步探究其分子机制发现Dip G可以ERβ依赖性诱导GABARAPL1基因的表达,从而促使TNBC细胞分化,在体内外都有很好的抗肿瘤作用。我们首次发现天然小分子促进三阴性乳腺癌细胞由高恶性表型向低恶性表型分化的特点,并且首次揭示GABARAPL1与细胞分化相关的特性,将为难治性TNBC的治疗提供新的治疗方案,奠定理论基础。