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目的分析2016~2017年嘉兴市第一医院分枝杆菌菌种鉴定及其耐药情况,并采用比较蛋白质组学研究结核分枝杆菌存在的可能耐药机制,为本市耐药结核病的防控策略提供科学依据。方法对嘉兴一院近两年1646例结核病患者的痰液进行分枝杆菌培养及药物敏感性试验,将不同耐药模式结核分枝杆菌及全敏菌株通过双向电泳得到的全菌蛋白表达图谱进行比较分析,发现的差异表达蛋白利用基质辅助激光解吸及电离飞行时间质谱仪进行质谱鉴定,并通过蛋白质数据库对差异蛋白斑点相应的基因进行序列分析。结果痰培养结核分枝杆菌1123例,培养阳性率68.23%(1123/1646),总耐药率17.10%(192/1123),单耐药率9.97%(112/1123),耐多药率3.38%(38/1123),多耐药率3.74%(42/1123)。单药耐药顺序为异烟肼(INH10.86%,122/1123)、链霉素(SM9.71%,109/1123)、利福平(RFP3.83%,43/1123)、乙胺丁醇(EMB3.38%,38/1123)。初治耐多药率2.43%(22/907),复治耐多药率7.41%(16/216),差异有统计学意义(χ2=13.24,P<0.05)。非结核分枝杆菌感染以男性66.90%(97/145)为主,检出率8.09%(145/1646),检出率随年龄上升而增加;初复治患者非结核分枝杆菌的检出率分别为7.05%(88/1249)和14.36%(57/397),差异有统计学意义(χ2=20.05,P<0.05);非结核分枝杆菌总耐药率91.03%(132/145),其中最高为INH88.97(129/145),其他依次为SM(79.31%,115/145)、RFP(66.90%,97/145)、EMB(51.72%,75/145)。发现不同模式耐药结核分枝杆菌与全敏菌株的差异表达蛋白斑点共21个,经质谱鉴定有5个蛋白获得明确的肽质量指纹图谱,它们分别为Rv0444c、Rv1446c、Rv3146、Rv3002c和Rv2159c。结论嘉兴一院结核分枝杆菌耐药率低于2010年全国流调水平,说明近两年我院结核病耐药防控策略成效显著;非结核分枝杆菌普遍耐药、患病率随年龄增大而上升,需早期识别与诊治;5个差异表达蛋白(Rv0444c、Rv1446c、Rv3146、Rv3002c及Rv2629c)可能与结核分枝杆菌耐药机制密切相关。