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NADH（Nicotinamide adenine dinucleotide）被称为21世纪“生物火箭燃料”,广泛用于保健品行业,为人们延年益寿做出了重要贡献。NADH是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的还原态,具有不耐酸、不稳定,易发生氧化降解,口服后不能顺利被吸收的特点,使其应用受限。目前NADH有多种给药方式如口服、注射等,不可避免的导致频繁给药这一缺点。为了提高患者的顺应性,同时增加NADH的生物利用度,维持恒定的有效血药浓度,开发可间隔较长时间给药的NADH脂质体和醇质体具有重大的意义。脂质体和醇质体通常系指粒径在25～1000nm的磷脂双分子层囊泡,能够负载亲水性或亲脂性药物。与皮肤结构具有高度相似性,从而能够提高药物的透皮能力,增加生物利用度,降低不良反应,是目前透皮给药载体中应用最广的一种类型。本课题将NADH用脂质体或醇质体负载,并对其药代动力学和药效学进行了初步评价,围绕NADH的制备工艺和性能研究开展了系统的研究工作,主要分为以下几个方面:第一部分:使用卵磷脂和胆固醇为原料,以NADH为模型药物,采用旋转蒸发法制备了ZZT-NADH（载药脂质体）和ZZT-Blank（空白脂质体）纳米囊泡。以包封率和粒径为依据,优化制备条件。包封率最高为88.11%,载药量为97.75%,平均水合粒径为129.62±2.63nm,具有良好的负载药物性能。TEM显示脂质体为均匀的球形囊泡,粒径为76.33±19.06nm,有明显的双分子层结构;随着温度的升高,脂质体的酸值和过氧化值增大幅度不明显,说明脂质体具有较好的稳定性;FT-IR表明NADH与脂质体没有生成新的化学键,通过相互作用形成氢键令脂质体更加稳定;通过DSC测试表明与NADH-PBS（4.3℃）相比,ZZT-NADH具有较低的相变温度（-7.9℃）,能够使脂质处于相对无序状态,增强囊泡在磷脂膜上的流动性;激光共聚焦实验显示出ZZT-NADH荧光各向异性低,内部结构分布比较均匀,进一步证实脂质体相变温度低;细胞毒性实验表明脂质体细胞的毒副作用极小,且ZZT-NADH能够使细胞增殖至120%,证实了NADH具有抗氧化性;抗氧化性实验说明当ZZT-NADH加入量为20μL时,自由基清除率接近100%,肯定了ZZT-NADH的抗氧化性;体外释放实验表明,脂质体在p H 6.8的PBS溶液中2h内药物的释放率高达80%,脂质体的优异性能使其成为一种潜在的透皮给药载体。第二部分:采用注入法形成具有高流动性和变形性的CZT-NADH（载药醇质体）和CZT-Blank（空白醇质体）囊泡,以包封率和粒径为依据,优化制备条件,醇质体的包封率最高为61.41%,载药量为98.71%,平均水合粒径为179.60±3.23nm,具有良好的负载药物的性能。TEM显示醇质体是粒径为90.49±11.55nm的球形囊泡,有明显的磷脂双分子层;在4、25、40℃条件下储存60d,酸值和过氧化值增大幅度不明显,说明醇质体具有较好的稳定性;FT-IR表明NADH与醇质体通过相互作用形成氢键,令醇质体更加稳定;DSC证实CZT-NADH（-28.0℃）的相变温度低于NADH-Ethoanol（-25.0℃）,能够使脂质处于相对无序状态,增加囊泡在磷脂膜上的流动性。激光共聚焦实验显示出醇质体的内部结构分布较均匀,各向异性低;通过细胞毒性实验确定醇质体不仅具有较低的细胞毒性,一定浓度的CZT-NADH还能促进细胞增殖至120%,肯定了NADH的抗氧化性能。抗氧化性测试表明CZT-Blank本身无抗氧化性,当CZT-NADH的加入量为20μL的时候,自由基清除率达到90%,充分证明了抗氧化性的确是由药物来提供的;体外释放实验表明醇质体在p H 6.8的PBS溶液中2h内药物的释放率高达80%,醇质体的优异性能使其成为一种潜在的透皮给药载体。第三部分:使用小鼠离体皮肤来探究脂质体/醇质体的透皮性能,通过FT-IR、DSC、CLSM和体外透皮实验,对NADH在皮肤上的高流动性和变形性以及透皮后的各项性能进行表征。FT-IR图谱显示与空白皮肤相比,对称和不对称亚甲基的伸缩吸收振动峰强度增加,意味着脂质正在由有序向无序转变,增加了角质层中脂质的流动性,-CH2剪切振动带宽度显著增加,正交晶格的含量降低,表明NADH脂质体/醇质体在一定程度上增加了皮肤角质层的通透性。DSC通过比较相变温度来研究脂质状态,脂质体(TZZT-NADH/Skin=30.83℃)和醇质体(TCZT-NADH/Skin=36.34℃)属于低相变温度,表明ZZT-NADH和CZT-NADH能够使皮肤中角质层的脂质处于相对无序的状态。通过CLSM表征在皮肤表层、表层毛囊、皮肤深层和深层毛囊中观察到荧光染料FITC和RB的积累,包裹在脂质体/醇质体中的NADH也深深地穿透表皮和真皮,证实了脂质体/醇质体可携带药物渗透至皮肤深层组织。体外透皮研究实验表明,脂质体/醇质体离体鼠皮中2h内药物的释放率约为40%,24h后的释放率达到近80%。24h后药物的累积透皮量达到1100μg/cm2,动力学模型表明NADH脂质体/醇质体囊泡的释放行为符合Higuchi模型,说明药物释放是通过融合和侵蚀作用实现的,渗透可以维持24h,达到一种长效缓释的作用,说明脂质体/醇质体作为透皮制剂的载体,有较高的渗透性和较快的释放率以及较大的透皮量,有望作为一种优良的载体广泛应用于透皮制剂上。