肝硬化腹水大鼠血管加压素与水通道蛋白的研究及特利加压素作用机制探讨 背景：腹水是失代偿肝硬化患者常见的症状之一，它严重影响了肝硬化患者的生命质量与生存率，诱发致命并发症。肝硬化腹水的发生机制甚为复杂，迄今仍未完全阐明。腹水患者存在严重的水钠潴留，其发生机制包括有以系统性低血管阻力为特征的高动力循环，以及与之相关的血管加压素系统、肾素一血管紧张素系统等代偿通路的激活等。人体内存在两种血管加压素受体：V1受体、V2受体，其中V1受体还可分为V1a受体、V1b受体。V1a受体分布于血管平滑肌，与血管收缩有关；V2受体则位于肾脏远端小管与集合小管上皮主细胞上，血管加压素通过V2受体作用于水通道蛋白-2（AQP-2）。AQP1是存在于肾脏的另一种水通道蛋白，它主要分布于近端小管上皮细胞的刷状缘及髓襻降支细段。此外，AQP1还存在于腹腔腔面的毛细血管内皮和系膜中，可能提供了在渗透压驱动下经腹膜屏障进行水转运的一条途径。对于肝硬化腹水情况下AQPs的表达，采用的模型不同，往往得到不同的结果。近来有文献报道，非选择性V2受体促进剂——特利加压素具有改善肝肾综合征患者肾功能及增加尿量的作用，但它的作用机制还有待于进一步的研究。 第一部分 肝硬化门脉高压伴腹水大鼠模型的建立 目的：建立一种制备方法简便、具有高存活率及成模率的肝硬化、门脉高压伴腹水的大鼠动物模型。 方法：80只重量为200～250g的雄性SD大鼠，随机选取10只为正常对照组，其余70只为肝硬化腹水造模组。对于造模组大鼠的处理，第1周为诱导期，每天给予苯巴比妥溶液（35mg％）作为饮用水。第2周始每周给予40％CCl₄-橄榄油溶液皮下注射二次，每次剂量为0.2ml／100g，首剂加倍，第九周始改为每二周三次直至第14周。每周测量大鼠腹围，第14周进行腹腔穿刺以判定有无腹水。随机选取6只腹腔穿刺有腹水的大鼠和6只正常对照组大鼠进行解剖，肉眼观察肝脏及脾脏的大体形态改变，测定门静脉压力，取肝脏组织进行有关组织学的检查，采血进行有关肝肾功能的检查。 结果：第14周，肝硬化腹水造模组70只大鼠存活37只。37只共有36只存在复旦大学博士学位论文腹水，相对成模率为97.3%。用精确卡方检验，与本科室同期进行的单纯CC14造模法相比较，存活率无明显差异（52.9%vs52%，p>0.05），而无论相对成模率还是绝对成模率均明显增高（973%vs n.5%;51.4%vs6%，p<0.01）。肝硬化腹水造模组的肝脏肉眼见大鼠肝脾明显肿大，表面凹凸不平，可见大小结节，肝脏组织学检查显示肝硬化、假小叶的形成。肝硬化腹水造模组的门静脉压力较之正常对照组明显升高（17.67士3.47 vs 8.67士l.o3emH20，p<0.01）。肝硬化腹水造模组血清总胆红素、谷丙转氨酶及谷草转氨酶较之正常对照组明显升高（P<o.05），而肝硬化腹水造模组血清白蛋白较之正常对照组明显降低印<0.01)。结论:本实验经对CC从加苯巴比妥联合造模法加以改良，获得了一种肝硬化门脉高压伴腹水的大鼠模型，为进一步研究创造条件。