【摘 要】
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采用传统的平板初筛、摇瓶复筛的方法,筛选出一株具有较高选择性降解外消旋1,2-丙二醇和较高底物耐受性的菌株。通过摇瓶试验表明其底物浓度在0.292mmol/ml时,(R)-1,2-丙二醇
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采用传统的平板初筛、摇瓶复筛的方法,筛选出一株具有较高选择性降解外消旋1,2-丙二醇和较高底物耐受性的菌株。通过摇瓶试验表明其底物浓度在0.292mmol/ml时,(R)-1,2-丙二醇完全分解掉,S-1,2-丙二醇留在发酵液中。 采用面包酵母催化还原丙酮醇制备(R)-1,2-丙二醇,对制备工艺进行了初步的探索。发现乙醇作为辅酶(NADH)再生的共底物是非常有效的。最优惠转化条件为:转化时间25小时,丙酮醇浓度0.154mmol/ml,pH值7.0,酵母浓度150g/L,共底物乙醇浓度0.339mmol/ml。在此基础上,用1.5L搅拌式发酵罐进行制备(R)-1,2-丙二醇的放大试验。采用分批流加底物和共底物的方法,在搅拌转速500r/min,通气量0.8L/min,温度30℃,pH6.5下,转化25小时,发酵液的(R)-1,2-丙二醇浓度为0.278mmol/ml,产率为62.3%,ee>100%。 用酵母进行了氧化拆分外消旋1,2-丙二醇的试验研究。研究了操作条件对拆分结果的影响。结果表明,氧的供给是影响拆分的重要因素,随氧供给的增加,产物丙酮醇的浓度增加,转速在250r/min时,产物浓度最大。外消旋丙二醇浓度在0.14~0.82mmol/ml间进行试验,结果表明,随底物浓度增加,产物丙酮醇的浓度增加,但是产物得率降低。底物浓度为0.14mmol/ml时,产物得率为38%。最优酵母浓度为60g/L。pH值在4~9.5间对丙酮醇浓度几乎没有影响。 以上实验结果对用生物催化合成和拆分手性1,2-丙二醇有重要的借鉴意义。
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