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背景自噬是一种在正常细胞和病态细胞中普遍存在的生理机制,某些肿瘤细胞中自噬活动低下与肿瘤的发生有一定的关系。抗肿瘤药物可以诱导细胞产生自噬,并参与自噬的分子调控,同时它也可能导致细胞凋亡。抗肿瘤药物引起的细胞自噬对肿瘤细胞产生正负两方面的影响,将自噬途径作为抗肿瘤药物的靶点有着广阔的前景。砷剂是我国首先发现的抗白血病药物,近年又被用于治疗多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症和各种实体瘤,但其确切抗肿瘤机制尚不十分清楚。目的研究白噬特异性抑制剂3--甲基腺嘌呤(3-MA)对三氧化二砷(As203)诱导急性T细胞白血病系Jurkat细胞凋亡的影响及机制,为进一步研究自噬在急性T细胞白血病发展过程中的作用提供依据。方法1.XTT法检测三氧化二砷(As203)对急性T细胞白血病细胞系Jurkat细胞的增殖抑制作用。2.电镜下观察不同浓度As203作用Jurkat细胞24h后细胞形态。3.免疫印迹和流式细胞术检测微管相关蛋白1轻链3B(LC-3B)蛋白的表达变化。4. AnnexinV-FITC/PI双染法、流式细胞术检测3-MA对三氧化二砷诱导急性T细胞白血病凋亡的影响。结果1.As203可以抑制急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞的生长,这种作用呈剂量和时间依赖性。2.2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L三氧化二砷作用Jurkat细胞24h后在电镜下可观察到自噬、凋亡、坏死的不同形态,并且自噬体数目不断增多。3.5μmol/L As2O3处理Jurkat细胞0h,24h,48h后,LC-3B的平均荧光强度相对倍数分别(3.1±0.2)倍、(4.6±0.31)倍、(34.2±4.5)倍,组间相比,差异有统计学意义(P<0.05),与生长抑制率一样呈现时间依赖性增强；免疫印迹也显示As203处理24h和48h后,LC-3B的蛋白表达逐渐增强；4.相对于As203组(33.4±9.1)%的生长抑制率,3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合As203处理细胞后,48h的生长抑制率为(60.6±8.3)%,差异明显,而LC-3B的表达明显降低。联合应用自噬抑制剂3-MA后Jurkat细胞的凋亡率(44.96±3.60)%,与单用As203组(2.94±0.26)%相比明显增加,差异有统计学意义。结论自噬抑制剂3-MA可以增加三氧化二砷(As203)引起的急性T细胞白血病细胞系Jurkat细胞的凋亡细胞百分数,其作用机制与诱导凋亡及抑制自噬密切相关。