抑瘤素M(oncostatin M)作为一种多功能的细胞调节因子,可作用于多种细胞,具有调节基因活性、细胞存活、增殖和分化的潜在功能,在炎症反应、造血作用、肝脏发育以及免疫系统等方面展示出独特的生物学活性,具有重要的生物学作用。本研究利用基因拼接方法,以人胚胎组织DNA为模板,通过PCR技术获得了成熟hOSM基因序列,构建了成熟hOSM的毕赤酵母真核表达载体pPICZαC-hOSM。电转化毕赤酵母X-33后提取酵母基因组DNA,使用特异性PCR引物进行PCR鉴定,证实成熟hOSM基因已经稳定整合到酵母基因组中,从而建立了hOSM毕赤酵母的高效表达体系。取其培养液上清经SDS-PAGE和Westernblot证实获得了相对分子量约为30kDa的rhOSM蛋白。通过SDS-PAGE和Westernblot方法筛选出能够稳定、高效分泌表达rhOSM的酵母工程菌。并首次利用80L发酵罐进行rhOSM的大规模发酵,摸索出其最佳发酵条件,即在发酵液pH5.4的条件下,甲醇诱导表达36h时放罐,rhOSM产量可达100mg·L-1,国内外未见相关报道。并采用SP Sepharose XL阳离子交换树脂及SourceTM30RPC反相疏水柱层析对其发酵产物进行纯化,纯度可达95%,收率可达50%。本实验为下一步进行工业化生产及进一步探究OSM在体内体外的生物学作用及其潜在的临床应用奠定基础。