目的:构建针对表皮生长因子受体（EGFR）基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体,稳定转染人卵巢癌细胞株SKOV3,检测RNA干扰（RNAi）对卵巢癌细胞表皮生长因子受体基因的表达、细胞生长及细胞体外侵袭力的影响。方法:根据siRNA的设计原则,设计针对EGFR基因的特异性RNA干扰序列,体外合成该序列后将其定向克隆入线性化质粒pSilencer^TM 2.1-U6 neo,DNA测序证明插入序列的正确性。采用脂质体法将重组质粒转染至SKOV3细胞,用抗生素G418筛选稳定转染克隆。实验分3组:正常对照组、非特异性转染组、特异性转染组。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫细胞化学（ICC）方法分别鉴定转染前后EGFR基因在mRNA和蛋白水平表达的变化;平板克隆形成法检测细胞生长增殖能力的变化;Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭力的变化。结果:DNA测序证实EGFR-shRNA表达载体的插入序列完全正确,此表达载体可特异性抑制EGFR基因的表达;特异性转染组细胞EGFR mRNA的表达与其他两组相比明显减弱（F=50.45,q=12.87,11.72,P<0.01）;EGFR蛋白表达明显下调（F=61.54,q=14.58,11.46,P<0.01）;细胞生长增殖能力减弱（F=130.12,q=21.12,18.15）;穿过人工基底膜的细胞数量明显减少（F=34.09,q=11.26,8.34,P<0.01）。结论:靶向EGFR的特异性siRNA转染SKOV3细胞后可有效抑制SKOV3细胞中EGFR基因的表达,进而抑制细胞增殖能力和体外侵袭能力。