小花清风藤饮片制备工艺及药效学初步研究

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目的比较10个不同采集地点的小花清风藤茎、叶中槲皮素含量差异。采用正交试验法对小花清风藤饮片的制备工艺进行优选,选择适当的因素与水平,为后期产品生产与开发奠定基础。通过对小花清风藤茎、叶的主要药效学研究,了解其在解酒和预防醉酒方面的药理作用,供临床用药参考。方法槲皮素的含量测定采用高效液相色谱法,C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇—0.1%磷酸(75:25);检测波长:360nm;柱温:24℃;流速:1m L/min;进样量:20μl。小花清风藤饮片的制备分为:萎凋、揉捻、半发酵、干燥。通过正交试验法,以槲皮素含量和浸膏收率为指标,采用加权评分法综合评估小花清风藤饮片的制备工艺条件。将小鼠随机分为小花清风藤茎提取液组、叶提取液组、阳性对照组和空白对照组。每组10只,雌雄各半。给药前禁食不禁水12 h。预防醉酒:各组给予相应的受试物。灌胃给药后30 min,根据体重灌胃一定量白酒。取其仰位,当动物仰位姿势持续30 s以上,即可认为翻正反射消失,即为醉酒指标。记录各组小鼠翻正反射消失和恢复的时间。解酒:小鼠,根据体重灌胃一定量白酒。观察记录各组小鼠翻正反射消失时间。翻正反射消失后立即灌胃给予相应的受试物。观察记录各组小鼠翻正反射恢复时间。结果2-1茎中槲皮素含量最高,10-1茎中槲皮素含量最低。5号、7号、9号采集地的叶中槲皮素含量都较高。1号采集地采得的小花清风藤植株中槲皮素含量较低。小花清风藤茎:半发酵实验各因素作用主次顺序为湿度>温度>时间>厚度。方差分析表明,各因素对试验均无显著性影响。最终确定小花清风藤茎的最佳半发酵工艺为26℃、湿度75%、厚度2cm、发酵时间2h。干燥实验各因素作用主次顺序为温度>厚度>时间。方差分析表明,温度和厚度为主要影响因素,具有显著性(P<0.05)。时间对试验无显著性影响。综合实验结果和经济学方面考虑,最终确定小花清风藤茎的最佳干燥工艺为80℃、干燥时间1h、厚度1cm。小花清风藤叶:半发酵实验各因素作用主次顺序为厚度>时间>湿度>温度。方差分析表明,各因素对试验均无显著性影响。最终确定小花清风藤的叶的最佳半发酵工艺为26℃、湿度95%、厚度4cm、发酵时间3h。干燥实验各因素作用主次顺序为温度>时间>厚度。方差分析表明,温度和时间为主要影响因素,具有显著性(P<0.05)。厚度对试验无显著性影响。综合实验结果和经济学方面考虑,最终确定小花清风藤叶的最佳干燥工艺为80℃、干燥时间2h、厚度2cm。小花清风藤的茎和叶均具有一定程度的解酒作用(与空白对照组比较:P<0.01;与阳性对照组比较:P>0.05),无明显的预防醉酒的作用(与阳性对照组、空白对照组相比,均为P>0.05)。结论不同地点采集的小花清风藤的槲皮素含量不同,小花清风藤同一植株的茎和叶的槲皮素含量也不同。总体来说,叶中槲皮素的含量高于茎。小花清风藤的最佳制备工艺如下:1.茎萎凋——茎温25℃左右,时间3.5h。半发酵——室温26℃、湿度75%、厚度2cm、发酵时间2h。干燥——80℃、干燥时间1h、厚度1cm。2.叶萎凋——叶温25℃左右,时间2.5h。揉捻——先轻揉10min,再重揉15min,最后松揉5min。半发酵——室温26℃、湿度95%、厚度4cm、发酵时间3h。干燥——温度80℃、干燥时间2h、厚度2cm。小花清风藤的茎和叶均具有一定程度的解酒作用,但无明显的预防醉酒的作用。
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