好食脉孢菌发酵麸皮制备游离阿魏酸及其改性研究

来源 :哈尔滨商业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:healtw
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近年来阿魏酸逐渐进入人们的视野,以其为主要物质的医疗药物,功能性食品等都如雨后春笋般诞生。其良好的清除自由基、抗菌消除炎症、预防肿瘤、降血脂等特性深受人们喜爱和关注,因而使其具有了良好的开发和应用前景;中国是小麦种植与出产大国,而加工后的小麦麸皮,多被用作动物饲料的投喂,而较少再次利用,进而造成了谷物资源的极大浪费。本课题以小麦麸皮为原材料,采用固态发酵技术,提取麸皮中丰富的阿魏酸资源,并在阿魏酸分子中引入亲水性较强的葡萄糖基团,制备以阿魏酸葡萄糖酯为主要成分的新型生物饲料添加剂。主要研究方法与结果如下:本文探索研究了好食脉孢菌在固态发酵条件下,发酵小麦麸皮生产阿魏酸(游离型)的最佳工艺条件。通过单因素试验结合正交试验,以阿魏酸(游离型)得率为考察指标,得到最优阿魏酸生产工艺参数为:好食脉孢菌接种量达5%、固态发酵培养温度30℃、麦麸和水料液比1:0.75、固态发酵培养时间5 d。在以上条件下,阿魏酸(游离型)的得率为71.45%。以浓缩冻干后得到的游离型阿魏酸样品为原料,引入葡萄糖基团对阿魏酸分子进行结构修饰。以阿魏酸的转化率设立为考察指标,且通过单因素结合正交试验法,探索合成阿魏酸葡萄糖酯的最优工艺参数:在催化反应时间为32 h、阿魏酸酯化反应温度为60℃、丁酮配比1%甲醇溶液为反应介质、固定化脂肪酶添加量10%、底物的酸糖摩尔比为1:1,阿魏酸转化率达到最高为25%。为进一步提高糖酯合成速率和转化率,采用纳米金与南极假丝酵母脂肪酶形成的金-酶杂化体系作为新型催化剂,催化葡萄糖酯化改性阿魏酸,以杂化酶催化效果为考察指标,采用紫外光谱结合红外光谱分析法,分别测定杂化前后南极假丝酵母脂肪酶结构的变化,确定制备杂化酶最佳工艺为:0.7 g假丝酵母脂肪酶加入10 mL粒径为11.55nm的纳米金溶液,于30℃恒温振荡反应器内反应24 h;并确定采用杂化酶催化糖酯化改性阿魏酸的最佳工艺为:丁酮复配1%甲醇溶液为反应介质,在底物酸糖比为1:1、反应时间为24 h、反应温度为60℃、杂化酶添加量为10%,可以获得更高的阿魏酸转化率,为36.8%。试验还探究了阿魏酸改性前后的理化特性和生物特性,研究发现葡萄糖酯具有优于阿魏酸的生物特性。其中改性前后对DPPH自由基的清除,阿魏酸葡萄糖酯好于阿魏酸,除此之外,阿魏酸与阿魏酸葡萄糖酯二者对羟基自由基和H2O2也有着优秀的清除效果;二者对于二价铁离子也有着显著的螯合作用,并且二者溶液浓度与螯合能力呈正相关,在6.0 mg/mL的相同浓度时,阿魏酸葡萄糖酯对于二价铁离子的螯合能力为67%,是阿魏酸的1.2倍;此外,阿魏酸葡萄糖酯相比于阿魏酸拥有着更优异的水溶性表现,室温条件下可达到阿魏酸的28倍;抑菌性试验得到,改性前后二者对于大肠杆菌、酵母菌以及金黄色葡萄球菌都有着一定抑制能力,并且均对于黑曲霉无显著抑制能力。
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