牙胚发育中ADAM28基因的克隆、表达和功能研究

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牙齿发育是两种相邻组织一外胚上皮和神经嵴来源的间充质相互作用的结果,呈时空变化的基因调控在牙胚发育过程中发挥关键作用,调节细胞的增殖、分化和凋亡,决定牙胚的发育进程。金属蛋白酶解离素28(adisintegrin and metalloproteinase 28,ADAM28)是ADAM家族中的新成员,是定位于细胞膜且具备自身催化活性的分泌型糖蛋白,是前期我科采用改良消减杂交技术从先天性牙根发育不良患儿的差异表达基因中筛选出来的牙齿、牙根发育相关基因。ADAM28在诸多生理过程中起着重要作用:参与细胞增殖、分化,胞外基质重建、血管形成和细胞迁移等。但是,目前尚无有关ADAM28与牙齿发育关系的研究报道。 本课题的研究目的是从转录、翻译和蛋白水平探讨ADAM28在牙胚发育过程中的时空分布特点及对牙源性间充质细胞增殖、分化、凋亡等生物学特性的影响,并从中分析它可能的作用机制,为今后对ADAM28功能的深入研究提供可靠的实验和理论依据。 本课题采用组织学、免疫组织化学、细胞培养、基因重组、基因转染、ELISA、Western blot、RT-PCR、反义核酸等技术方法进行了以下四部分实验研究,主要研究内容和结果如下: 第一部分 采用组织学方法观察到小鼠下颌第一磨牙牙胚从蕾状期到牙根形成期的发育时序及形态特点。应用免疫组织化学方法检测到BSP、OPN、DSPP、
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