华东覆盆子(Rubus chingii Hu),又名掌叶覆盆子,为蔷薇科悬钩子属植物,分布于浙江、江苏、安徽、江西、福建、广西,其近成熟果实入药称为覆盆子,收载于《中国药典》2005年版一部,具有益肾,固精,缩尿之功效,用于肾虚遗尿,小便频数,阳痿早泄,遗精,滑精。研究背景:覆盆子作为传统药用植物,在我国已经有几千年的使用历史,疗效显著。但对于它的现代研究并不充分,因此,对覆盆子的补肾化学成分进行研究,对于建立覆盆子质量标准,开发利用覆盆子资源具有非常重要的意义。研究目的:通过对华东覆盆子药理活性研究,明确其补肾活性作用以及有效部位,进一步对有效部位进行系统的化学成分研究。为覆盆子资源的开发利用及补肾新药的研发奠定基础。研究内容和方法:样品的来源:华东覆盆子采自浙江省。1、通过腹腔注射氢化可的松诱导小鼠肾阳虚,以小鼠的体重,血清睾酮浓度,以及肾脏和睾丸病理学改变为指标,考察了不同剂量覆盆子提取物对肾阳虚小鼠的保护作用,对覆盆子提取物进行药效学评价。2、通过比较提取物的石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位、水部位的低、中、高三个剂量对肾阳虚小鼠体重下降,血清睾酮浓度降低,肾脏细胞缩小,胞浆减少,睾丸各级精母细胞数量减少的改善效果,确定覆盆子提取物对肾阳虚小鼠保护作用的活性部位。3、对覆盆子提取物的活性部位进行系统的化学成分研究:采用溶剂萃取,硅胶层析、凝胶柱层析、重结晶等方法分离纯化获得单体化合物,应用理化常数测定和光谱学方法(mp、IR、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC、COSY、NOSEY、EI-MS、ESI-MS)对其结构进行鉴定。结果和结论:1、小鼠注射氢化可的松后,与空白组比较,体重明显下降,血清睾酮浓度明显降低,肾脏细胞缩小,胞浆减少,睾丸中各级精母细胞数明显减少。与模型组相比,给予阳性药物甲睾酮片、金匮肾气丸和覆盆子提取物均能明显改善氢化可的松诱导的肾阳虚小鼠体重下降,血清睾酮浓度降低,肾脏及睾丸的病理学改变。与模型组相比,中剂量(6g/kg生药),高剂量(18g/kg生药),阳性药物组均具有显著性差异(P<0.05),且高剂量组优于中剂量组。表明覆盆子提取物中、高剂量对小鼠肾阳虚具有保护作用。2、给予氢化可的松诱导的肾阳虚小鼠低、中、高剂量(2g/kg、6g/kg、18g/kg生药)的覆盆子提取物的石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位、水部位,各组均能一定程度改善氢化可的松诱导的肾阳虚小鼠的各指标,与模型组相比,正丁醇萃取部位的中、高剂量具有显著性差异(P<0.05),表明覆盆子对于肾阳虚的保护作用活性部位为正丁醇部位。3、从覆盆子果实提取物的正丁醇部位分离得到5个化合物,鉴定其中4个,分别为4’,5,7-三羟基黄酮醇-3-O-β-D(6’’-对羟基桂皮酰基)-葡萄糖苷(Y-6)、山奈酚(Y-9)、覆盆子素(Y-11)、槲皮素(Y-15),其中Y-11为新化合物,作者命名为覆盆子素。4、从覆盆子的二氯甲烷部位分离得到11个化合物,鉴定其中9个,分别为二十六烷醇(Y-1)、β-谷甾醇(Y-2)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(Y-3)、对羟基苯甲酸醛(Y-4)、齐墩果酸(Y-5)、Stigmast-5-en-3-ol,oleate (Y-7)、H-2-indenone,2,4,5, 6,7,7a-hexahydro-3-(1-methylethyl)-7a-methyl (Y-12)、4-羟基-3甲氧基苯甲酸(Y-13)、liballinol (Y-14)。除β-谷甾醇和齐墩果酸,4-羟基-3甲氧基苯甲酸外,其余化合物均为首次从该植物中分得。