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目的： 食管鳞癌是消化系统肿瘤中恶性程度较高的常见肿瘤之一，通常治疗困难，预后不佳。目前对其发病、进展机制尚未完全明了，进一步了解食管鳞癌的发生、发展机制，提高早期诊断率、寻找有效的治疗途径和准确进行预后评估仍是当务之急。为此设计并开展本课题，通过RNA干扰手段构建缺氧诱导因子-1α(Hypoxia Inducible Factor-1 alpha，HIF-1α)基因沉默细胞株并初步研究HIF-1α基因在食管鳞癌细胞中的功能，为今后深入研究食管鳞癌发病机制、开展基因治疗打下基础。 方法： 1．通过在食管鳞癌细胞系Eca-109中对绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein，GFP)报告基因的RNA干扰实验，了解食管鳞癌细胞Eca-109是否存在RNA干扰效应，摸索优化干扰实验条件以行后续研究。 2．构建针对HIF-1α mRNA的shRNA真核表达载体，测序鉴定后瞬时转染人食管鳞癌细胞Eca-109和胚肾细胞293T，以RNA干扰手段抑制HIF-1α的表达，经实时荧光定量RT-PCR和Western blot分别在