内消软脉汤激活皮下脂肪并抑制动脉粥样硬化的机制及临床研究

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zs1979
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近年来,随着人们生活水平的逐渐提高,以动脉粥样硬化为基础的相关心脑血管疾病的发生率正在不断增加,据最新流行病学研究,动脉粥样硬化的相关疾病已经成为人类死亡的主要原因之一。为了治疗动脉粥样硬化的相关疾病,学术界进行着不断地探索,但目前仍无十分有效的治疗措施。我们临床上使用“内消软脉汤”治疗动脉粥样硬化疗效显著,对患者血脂水平及炎症因子水平有一定的作用,推测其机制可能与腺苷A2A激活促进UCP1依赖性脂解有关,为了明确其疗效及作用机制,拟开展“内消软脉汤”的机制研究以及临床观察性研究。方法:试验一(临床试验):筛选50例确诊有颈动脉粥样硬化斑块的门诊患者,给予患者“内消软脉汤”,并记录患者服药前、服药后的颈动脉超声报告中的IMT、纵切厚度、横切厚度及面积等指标,并根据年龄、性别、斑块性质等方面对结果进行统计学分析,以评价“内消软脉汤”对颈动脉粥样硬化斑块的疗效。实验二(基础实验):根据不同的实验要求,将ApoE基因敲除小鼠和C57BL6J小鼠进行随机分组,分别给予不同剂量的“内消软脉汤”,完成相应的干预条件以后,收集待测样本,将其血清存于-80摄氏度冰箱,后续采用生化法测定血脂水平等相关指标;将取材的组织储存于液氮或福尔马林中固定,通过HE染色法观察小鼠主动脉斑块形态以明确药物疗效、观察小鼠各脂肪组织形态特征以明确各脂肪组织活化的情况;通过免疫组化法对小鼠各个部位的脂肪组织石蜡切片使用不同种类的一抗,进行目的蛋白表达情况的检测;通过western blot法检测各个部位脂肪组织UCP1等目的蛋白表达水平,最后对数据进行分析。结果:试验一(临床试验):“内消软脉汤”治疗后,不同性别、年龄段、不同斑块性质的患者以及不合并他汀类药物的患者颈动脉粥样硬化斑块的IMT、纵切厚度、横切厚度以及斑块面积均有下降,其中IMT、纵切厚度、斑块面积的下降具有统计学差异,横切厚度的下降不具有统计学差异;实验二(基础实验):1.“内消软脉汤”对小鼠动脉粥样硬化斑块及HS-CRP的影响”内消软脉汤“灌胃组动脉粥样硬化斑块面积明显减小,ApoE基因敲除小鼠与c57小鼠的HS-CRP均下降,其中,C57小鼠的结果有统计学差异,ApoE基因敲除小鼠的结果无统计学差异;与对照组相比,C57小鼠的HS-CRP在低剂量组约减少66.4%(*),高剂量组约减少15.2%(*)。2.“内消软脉汤”对小鼠脂肪细胞棕色化的影响根据HE染色结果,对照组ApoE-/-小鼠及C57小鼠的肩胛区脂肪细胞表现较为饱满、体积较大、单房结构脂滴,其染色较浅;“内消软脉汤”组别小鼠的脂肪细胞体积较小、HE染色变深,细胞核着色增多、单位视野见脂肪细胞数目增多,灌胃组小鼠腹股沟区脂肪组织也出现不同程度的活化,附睾区脂肪组织活化程度最小;根据免疫组化染色结果,与对照组相比,”内消软脉汤“组别小鼠的解偶联蛋白1(UCP1)的阳性染色比对照组深;根据Western Blot检测结果,与对照组相比,”内消软脉汤“组别小鼠脂肪组织中的UCP1蛋白表达随药物剂量依赖性增加;3.“内消软脉汤”对小鼠血脂水平的影响“内消软脉汤”对于ApoE基因敲除小鼠与C57小鼠各组血脂水平无显著差异性;4.“内消软脉汤”对小鼠脂肪组织腺苷A2A表达的影响根据免疫组化染色结果,与对照组相比,”内消软脉汤“组别小鼠的腺苷A2A的阳性染色比对照组深;根据Western Blot检测结果,与对照组相比,”内消软脉汤“组别小鼠脂肪组织中的腺苷A2A蛋白表达随药物剂量依赖性增加;结论试验一(临床试验):1、“内消软脉汤”具有消退颈动脉粥样硬化斑块IMT、纵切厚度及面积的作用。2、“内消软脉汤”对于女性患者斑块的IMT、纵切厚度的减小程度大于男性。3、“内消软脉汤”对于年龄在65岁以下患者的疗效更佳。4、“内消软脉汤‘对于混合性质斑块的IMT减小程度最大,对于软斑的纵切厚度减小程度最大,对于硬斑的面积减小程度最大。5、对于不使用他汀类药物的患者,“内消软脉汤”依然有效。实验二(基础实验):1、“内消软脉汤”可缩小ApoE基因敲除小鼠的As斑块面积。2、“内消软脉汤”可降低小鼠HS-CRP水平。3、“内消软脉汤”可激活小鼠UCP1依赖性脂解,其中,对于附睾区白色脂肪组织效果不明显。4、“内消软脉汤”对于小鼠血脂水平的影响无统计学差异。5、“内消软脉汤”可激活小鼠脂肪组织处腺苷A2A表达,考虑其表达可促进UCP1依赖性脂解。
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