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呋喃唑酮及其代谢物AOZ具有很强的毒性,易对人体健康造成危害,许多国家已将呋喃唑酮列为禁用药物,且不能在动源性食品中检测出呋喃唑酮及其代谢物AOZ。目前食品安全事件频发,仍有不法商贩继续使用呋喃唑酮,呋喃唑酮在动物体内迅速代谢为标志物AOZ,因此对畜禽产品中AOZ准确检测显得至关重要。目前AOZ残留的检测多采用仪器分析法,虽然准确性和灵敏度高,但是一般需要昂贵的大型仪器和专业技术人员,且检测过程繁琐,时间长,检测成本高,使其无法满足对样品大量快速筛查。因此,建立一种快速、灵敏的AOZ残留检测技术具有重要意义。本实验建立了AOZ残留检测的酶联免疫吸附法(ELISA)和化学酶免疫法(CLEIA)。首先,要对AOZ进行衍生化,利用对醛基苯甲酸将AOZ衍生化为半抗原CPAOZ。然后利用活化酯法分别将CPAOZ与卵清蛋白(OVA)和辣根过氧化物酶(HRP)偶联,合成包被原CPAOZ-OVA和酶标抗原CPAOZ-HRP。其次,对包被抗原与抗体稀释倍数、封闭液、竞争时间、二抗稀释倍数进行优化,分别建立了AOZ间接竞争CLEIA法和间接竞争ELISA法。然后,对包被抗体与酶标抗原稀释倍数、封闭液、竞争时间进行优化,分别建立了AOZ的直接竞争CLEIA法和直接竞争ELISA法。最后对四种方法进行方法评估,结果表明,间接竞争CLEIA法的IC50值为0.74ng/mL,对牛肉、猪肉和鸡肉的加标回收率为84.5%-97.8%,最低检测限为0.028ug/kg。直接竞争CLEIA法的IC50值为2.45ng/mL,对牛肉、猪肉和鸡肉的加标回收率为83.9%-93.5%,最低检测限为0.042ug/kg。间接竞争ELISA法的IC50值为1.096ng/mL,对牛肉、猪肉和鸡肉的加标回收率为87.4%-102.7%,最低检测限为0.225ug/kg。直接竞争ELISA法的IC50值为2.511ng/mL,对牛肉、猪肉和鸡肉的加标回收率为84.5%-104.0%,最低检测限为0.253ug/kg。四种方法除了对呋喃唑酮原药有·定交叉外,对其他结构类似物的交叉率均小于0.1%,且批内与批间的变异系数均小于11.5%。本实验建立的的AOZ四种酶免疫分析方法灵敏度、准确性及最低检测限均能满足实际样品检测的要求,可为监管部门提供AOZ的实验室快速检测方法。