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目的慢传输型便秘(Slow transit constipation,STC)又称慢通过性便秘或结肠无力,是一种功能性便秘(Functional constipation,FC),是指结肠的传输和转运功能失调,结肠收缩乏力致使结肠内容物的被推进速度减慢。STC患者最主要而明显的临床症状为粪便重量和大便次数减少,便意消失,伴腹胀,大便干燥如羊粪状并伴随着排出费力、排出困难等,严重影响患者的生活质量。益气健脾通便方是基于枳术丸基础上的加减方,对慢传输型便秘患者有明显疗效。本研究通过分子生物学手段探讨益气健脾通便方对慢传输型便秘大鼠结肠组织中c-kit m RNA以及PI3K/Akt/e NOS信号通路的作用机制,为其临床应用提供理论依据。方法选取72只健康清洁级成年SD大鼠,每只体重在200-240g,雌雄各半,饲养于安徽中医药大学动物实验中心屏障实验室。随机分为A:空白对照组;B:模型组;C:益气健脾通便方组;D:莫沙必利组,每组18只。分组后,计算得出各组大鼠在体重、性别上的差异均无统计学意义。吗啡是临床上常用的止痛剂,除外空白对照组(A组)的大鼠,其他54只实验大鼠(即B组、C组、D组)按每日2.5mg/kg剂量皮下注射盐酸吗啡,共45d,制造大鼠STC模型。全部大鼠均予以干预治疗,A组与B组:给予无菌生理盐水灌胃,每日2次,每次1m L;莫沙必利组(D组):将莫沙必利碾成粉末后,每15mg的莫沙必利粉末溶入100 ml蒸馏水中,配制成0.15mg/ml的莫沙必利溶液,予该浓度的莫沙必利溶液灌胃,每日2次,每次1m L;益气健脾通便方组(C组):按含生药浓度0.75ml/100g/d的益气健脾通便方,每只每日2次灌胃;每组18只老鼠,给药期间自由进食、饮水。用药4周后停药1周,PCR方法检测结肠细胞内c-kie m RNA的表达情况;活性炭灌胃法测定各组大鼠胃肠道传输时间,ELISA法检测各组大鼠的结肠组织中NO和内皮型NO合成酶(e NOS)含量;运用Western blotting方法检测解剖后各组大鼠结肠组织中的P-Akt蛋白的表达情况;并运用免疫组化观察各组大鼠结肠组织内cajal细胞的表达情况。结果1.B组与A组比较,大鼠日均粪便粒数明显减少,日均粪便质量明显减少、首粒黑便排出时间明显延长(p<0.05),免疫组化观察大鼠结肠组织内cajal细胞的表达水平明显降低;C组和D组与B组比较,日均粪便粒数明显增多,日均粪便质量明显增多、首粒黑便排出时间明显缩短(p<0.05),免疫组化观察大鼠结肠组织内cajal细胞的表达水平明显增多;C组、D组与A组之间组间两两比较则无统计学意义。2.B组与A组比较,大鼠结肠组织中NO和e NOS含量明显增高(p<0.05);与B组比较,C组和D组的大鼠结肠组织中NO和e NOS含量明显降低(p<0.05),C组、D组与A组之间组间两两比较无统计学差异(p>0.05)。3.B组与A组比较,大鼠结肠组织中P-Akt、c-kit m RNA的表达明显降低(p<0.05);与B组比较,C组和D组的大鼠结肠组织中P-Akt、c-kit m RNA表达明显升高(p<0.05);C组、D组与A组之间的组间两两比较无统计学差异(p>0.05)。结论PI3K/AKT/e NOS信号传输通路很可能参与了益气健脾通便方治疗大鼠STC的作用的分子机制,并且益气健脾通便方可以调节肠道蠕动及传输的主要靶细胞是结肠组织内的cajal细胞。