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本试验以食源性病原菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肠炎沙门氏菌)形成的单一菌和混合菌生物被膜为研究对象,研究了影响生物被膜形成的因素,并通过Real Time PCR方法分别检测单一菌和混合菌生物被膜中的金黄色葡萄球菌28种目的毒素因子转录水平的变化。得到如下结果:(1)结晶紫染色法、银染法和扫描电镜法均证明混合菌在培养24h时达到最大黏附度;混合菌生物被膜中的三种细菌的活菌数目均低于其单菌生物被膜中的数目;金黄色葡萄球菌在混合菌生物被膜中为优势菌。(2)以96孔微量板作为单一菌和混合菌生物被膜的黏附载体,通过结晶紫染色法测定了影响生物被膜的形成因素。①混合菌生物被膜的最佳培养基pH值为7.0,培养温度36℃,培养时间21 h;采用质量分数为1.6%的TSB培养基时,病原菌在最佳条件下形成的生物被膜黏附率最大;碳源促进了生物被膜的形成;NaCl质量分数大于0.4%时,食源性病原菌生物被膜的形成能力受到一定抑制。②化学防腐剂(EDTA)对混合菌生物被膜有抑制作用,且随着EDTA质量浓度的增加,混合菌生物被膜的黏附度逐渐降低,当添加0.25 mmol/L的EDTA时即可使混合菌生物被膜黏附率下降16.5%;检测AI-2分子活性进一步证实了随着EDTA浓度的增加,黏附度逐渐减少;EDTA仅对处于黏附期(0h～28h)的混合菌生物被膜有抑制作用;添加二价金属离子(Mg2+、Ca2+、Fe2+)可增强混合菌生物被膜的稳定性。③生物防腐剂(乳杆菌ALAC-1、ALAC-2、ALAC-3、ALAC-4和ALAC-5产抑菌物质)对单一菌和混合菌生物被膜及AI-2分子相对活性均有抑制作用,但其对单一菌生物被膜的抑制作用优于混合菌;ALAC-5和ALAC-1对病原菌生物被膜抑制率最高,对金黄色葡萄球菌生物被膜抑制率高达78.95%和69.47%。(3)荧光定量PCR发现,28种毒素因子在金黄色葡萄球菌中均被检出,且28种毒素因子在混合菌和单一菌生物被膜中表达量各不相同;混合菌相对于单一菌生物被膜,上调量显著的有肠毒素因子sep、ser,显著下降的是溶血素因子hla和脱皮毒素因子etd,肠毒素因子seb则表达量相等。