兔烧伤后中性粒细胞的凋亡和细胞因子的释放与急性肺损伤的关系

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目的:动态观察严重烧伤后兔肺泡灌洗液中中性粒细胞(poly-morphonucl earneutrophil,PMN)凋亡的发生以及细胞因子 TNF-α、IL-1β、IL-8等浓度的变化与肺损伤之间的关系。  方法:选健康新西兰大白兔36只,随机分为正常对照组和烧伤组。其中烧伤组又分为2、4、8、12、24h不同时间点烧伤组。共计6组,每组6只。烧伤组兔,剪去背部相当于30%体表面积兔毛,将脱毛部位皮肤浸入100℃水中12秒,建立30%TBSAⅢ度烫伤模型。正常对照组仅背部脱毛37℃水浸浴。做肺组织的病理切片,对比观察对照组和不同时相点烧伤组肺组织的病理变化。进行肺损伤的半定量评分。计算肺组织的湿干重之比(W/D)。分离纯化肺泡灌洗液中的PMN,应用流式细胞仪技术测定PMN凋亡、坏死、存活细胞比例及呼吸爆发功能的变化。应用双抗夹心的ELISA方法测定肺泡灌洗液中细胞因子 TNF-α、IL-1β、IL-8等浓度的变化。  结果:烧伤后肺组织各时相点的病理切片、肺损伤的半定量评分、湿干重之比(W/D)均较对照组有明显的变化。各项指标均符合急性肺损伤的变化。烧伤后兔肺泡灌洗液中的PMN凋亡延迟至12h,PMN坏死比率在烧伤后2h即显著升高,4h达峰值,8h恢复到烧伤前水平,12h又升高,随后降低,至24h降低至10.64%,明显低于正常对照组(P<0.05)。在烧伤后各时相点,肺泡灌洗液中存活的PMN较对照组明显增多。而肺泡灌洗液中PMN呼吸爆发从2h开始显著增强,8h达峰值。肺泡灌洗液中细胞因子TNF-α、IL-8自烧伤后2h浓度开始增高,12h达高峰,随后降低,24h仍然高于对照组。IL-1β的浓度自烧伤后2h开始增高,8h达到高峰,后降低,但24h仍然高于对照组。(P<0.01或P<0.05)。结论:?严重烧伤后兔肺组织各时相点的病理切片、肺损伤的半定量评分、湿干重之比(W/D)等的结果均显示为急性肺损伤。?严重烧伤时,PMN在兔肺组织中大量扣押,且正常的凋亡途径发生障碍,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物的持续释放,加重肺组织的损伤。?严重烧伤时,兔肺泡灌洗液中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-8等的浓度的升高与肺损伤的程度有密切的关系。
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