VEGF与PEDF在实验性大鼠角膜新生血管模型中的动态表达

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【目的】观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor , PEDF)在实验性大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization ,CNV)形成过程中的动态表达,探讨VEGF/PEDF比值变化与CNV组织发展进程的相关性。【方法】实验动物为35只健康成年雄性SD大鼠。随机抽取5只5眼(均为右眼)为0d组,不做特殊处理。其余30只30眼(均为右眼)采用1mol·l-1氢氧化钠溶液烧灼角膜诱导CNV模型,按伤后取材时间不同而分为1d、3d、5d、7d、10d、14d组。在上述6个时间点采用裂隙灯数字图像处理系统观察CNV长度并换算面积,颈椎脱臼法处死大鼠,即时摘除带1mm宽巩膜的角膜组织,迅速固定、包埋,用免疫组织化学染色的方法检测VEGF及PEDF蛋白的表达,并通过多媒体医用彩色图像病理分析系统半定量分析其结果。观察VEGF/PEDF比值动态改变与临床CNV发生及发展进程之间的相关性。【结果】烧伤后1d,角膜上皮中央部缺损,角膜明显肿胀,角膜缘显著充血,但未见明显CNV组织。伤后3d,角膜缘全周可见新生血管呈刷状生长,逐渐向角膜中心发展。伤后7d~10d,新生血管生长旺盛,稠密的CNV已有分支延伸至角膜中心,分支末端相互交织成网状。伤后14d,角膜上皮基本完整,CNV组织几乎布满整个角膜,部分血管分支萎缩。免疫组化显示VEGF和PEDF在正常角膜均有一定表达。CNV组织中,两者阳性表达均上调,VEGF表达于3d~7d最明显,14d后表达微弱;PEDF在7d~10d时表达最强烈,14d时下降。VEGF、PEDF上调时程及幅度均不一致,VEGF/PEDF比值呈现先增高后降低的趋势。【结论】VEGF与PEDF在碱烧伤诱导的大鼠CNV组织中阳性表达较正常角膜中显著增加,VEGF/PEDF比值动态改变与CNV组织的发展进程相关,VEGF与PEDF表达失衡可能参与CNV发生及发展过程的调控。
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