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目的:通过探究白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)与乳腺癌原位组织中吲哚胺2,3-双加氧酶(Indoleamine2,3-dioxygenase, IDO)共表达情况,和分析血清IL-6水平与原位IDO的关系,以及检测IL-6对人乳腺癌细胞株分泌IDO的影响,探讨乳腺癌细胞中IDO表达的分子机制。方法:1.收集天津医科大学附属肿瘤医院2011年1月手术切除的乳腺癌石蜡切片30例,免疫组织化学法检测IDO表达情况,用酶联免疫吸附试验法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)检测乳腺癌患者外周血IL-6水平,明确血清中IL-6水平与原位IDO表达水平的关系。2.免疫荧光法检测IDO、IL-6在肿瘤局部组织共表达情况,分析局部组织中IL-6与IDO有无相关性。3.培养表达IDO的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,加入不同浓度的IL-6重组因子和IL-6中和抗体,提取蛋白用Western blot法检测IDO蛋白表达情况,明确IL-6是否影响IDO的表达。4.在MDA-MB-231培养上清中加入STAT3特异性抑制剂JSI-124,提取蛋白用Western blot法检测pSTAT3和IDO蛋白表达情况,检测STAT3通路是否介导IL-6对于IDO表达的调控过程。结果:1.免疫组化结果显示乳腺癌组织中IDO蛋白表达率为73.33%(22/30),低表达或不表达率为26.67%(8/30)。乳腺癌组织中IDO表达水平与肿瘤大小、临床分期、组织学分级和淋巴结转移相关(均p<0.05)。2.乳腺癌患者外周血清IL-6水平为7.813±4.668pg/ml,血清中IL-6水平与乳腺癌患者肿瘤大小、临床分期、组织学分级以及腋淋巴结转移均相关,p<0.05。3.原位IDO阳性的患者与阴性患者比较,其外周血IL-6水平显著升高,P=0.023。4.应用WCIF Image J分析软件分析免疫荧光图像,肿瘤局部组织中IL-6与IDO的表达是呈正相关的,r=0.690,P=0.000。5. MDA-MB-231细胞培养上清中加入不同浓度的IL-6重组因子,提取蛋白用Western blot法检测IDO蛋白表达情况,检测结果发现随着IL-6重组因子浓度升高,IDO表达增加,提示IL-6可以促进乳腺癌细胞的IDO表达。6. MDA-MB-231细胞培养上清中加入不同浓度的IL-6中和抗体,提取蛋白用Western blot法检测IDO蛋白表达情况,检测结果发现随着浓度IL-6抗体浓度升高,IDO表达下降,IL-6中和抗体可以阻断IDO表达。7.在MDA-MB-231培养上清中加入STAT3通路特异性抑制剂JSI-124,提取蛋白用Western blot法检测pSTAT3及IDO蛋白表达情况,pSTAT3及IDO表达均下降,提示IL-6通过下游STAT3通路激活影响IDO表达。结论:1.乳腺癌患者肿瘤组织中IDO和IL-6表达呈正相关,且血清中IL-6的水平与原位IDO的表达相关。2.IL-6与IDO共表达于乳腺癌细胞中,且表达呈正相关,提示在乳腺癌中IL-6可能调控IDO的表达。3.在表达IDO的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞培养上清中加入IL-6重组因子可以促进IDO表达;而在细胞培养上清中加入IL-6抗体可以阻断IDO表达。提示IL-6参与乳腺癌细胞IDO表达的调控。4.在细胞培养上清中加入STAT3通路特异性抑制剂JSI-124,发现pSTAT3及IDO表达下降,提示IL-6通过下游STAT3通路激活影响IDO表达。