蒙药延胡索化学成分的分离鉴定及其抗炎活性分析

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蒙药延胡索是罂粟科植物延胡索(Corydalis yanhusuo W.T.Wang)的块茎,具有镇痛、镇静、催眠等功效,现代药理实验研究证明生物碱类化合物是其主要的生物活性成分之一。本论文以蒙药延胡索为研究对象,提取鉴定其中化合物,并应用高速逆流色谱(High-speed Counter current Chromatography,HSCCC)制备生物碱类化合物,同时采用分子对接技术筛选蒙药延胡索具有抗炎生物活性的化合物,为蒙药延胡索的深入研究提供实验依据,其内容如下:(1)采用乙醇提取蒙药延胡索,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对醇提物进行萃取。利用硅胶柱层析、薄层层析以及液相色谱法从蒙药延胡索乙酸乙酯部位提取物中共分离出19个化合物,鉴定出13个,它们分别是:d-紫堇碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、巴马汀、四氢小蘖碱、普鲁托品、四氢黄连碱、四氢紫堇萨眀、海罂粟碱、脱氢海罂粟碱、异紫堇球碱、四氢非洲防己胺和β-谷甾醇。(2)用高速逆流色谱(HSCCC)技术分离纯化延胡索乙素和去氢紫堇碱。利用离子树脂富集蒙药延胡索的总生物碱,应用超高效液相色谱进行分析,其条件是:流动相70%甲醇水溶液,流速0.3 m L/min,柱温40℃。经液相色谱分析,确定高速逆流色谱的溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(16:31:19:21,v/v/v/v)。在此溶剂体系下,上样量为0.5 g,流速2.0 m L/min,检测波长280 nm,转速900 r/min,分离纯化延胡索乙素和去氢紫堇碱,其纯度为95.10%和91.20%。(3)采用分子对接技术,探寻蒙药延胡索抗炎作用的有效成分。其中原小檗碱型生物碱四氢小蘖碱、去氢紫堇碱,阿朴啡型生物碱海罂粟碱以及甾体类化合物β-谷甾醇与抗炎蛋白COX-2、1S1R、1DVX均有较高的亲和力,作用较稳定,显示其具有潜在的抗炎生物活性,证明蒙药延胡索抗炎作用呈现出多成分、多靶点的作用机制。
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