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目的:采用机械压迫法制备豚鼠压疮模型,研究封闭式负压引流(vacuum sealing drainage,VSD)技术治疗3期压疮的效果及机制。方法:(1)造模:采用600-670g健康雄性白色豚鼠,用10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉后对豚鼠右侧后肢大转子皮肤反复压迫导致缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)以制备豚鼠IRI 3期压疮模型。(2)分组及干预:实验分为空白组(n=20)、常规处理组(n=20)和VSD处理组(n=20)。空白组不做任何处理;常规处理组常规换药后用无菌多孔聚氨酯海绵敷料和纱布覆盖,每日更换无菌敷贴;VSD处理组常规换药后借助多孔聚氨酯海绵敷料实施VSD,外科手术贴膜封闭,接通125mm Hg负压每天持续负压治疗8h,每日更换无菌敷贴。(3)效果评价:分别于干预1d、3d、7d、11d后随机选取每组实验动物5只观察创面愈合情况;创面面积的收缩率;创面组织病理学变化;创面组织细菌含量;运用一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和超氧化物歧化酶superoxide dismutase,SOD)测试盒监测豚鼠血清中NOS含量和SOD含量;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测不同时间点各组创面组织CD34和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达,并用Image Pro Plus图形处理软件计算微血管密度(microvessel density,MVD)和平均光密度值(mean optical density,MOD)。结果:(1)肉眼观察创面:干预1d后,空白组、常规处理组创面血性渗出液较多,创周皮肤组织水肿明显,VSD处理组创面血性渗出液较干预前减少。干预3d后,空白组创面暗红无光泽,血性渗出液比常规处理组和VSD处理组多,创周皮肤组织水肿无明显变化;常规处理组创面呈红色,血性渗出液、创周皮肤组织水肿较空白组减轻,创面开始缓慢收缩;VSD处理组创面呈红色,有少量淡红色渗出液,创周皮肤组织水肿情况较其余两组减轻,有散在的肉芽组织生长,创面快速收缩。干预7d后,空白组创面变黑、变硬,有少量血性渗出液,创周皮肤组织水肿情况较干预前减轻,创面开始缓慢收缩;常规处理组创面呈红色,渗出液少,创周皮肤组织仍有水肿,有少量肉芽组织生长;VSD处理组创面红润,无渗出液,创周皮肤组织水肿不明显,大量肉芽组织生长,创面面积收缩明显。干预11d后,空白组创面变黑结痂,针刺有少量血液渗出,创周皮肤组织水肿较前减轻,创面面积收缩较其它两组缓慢;常规处理组创面红润,大量肉芽组织生长,创面有少量结痂;VSD处理组创面结痂,无渗出,创面基本愈合。(2)创面面积收缩率:干预1d后,三组创面收缩率比较无明显差异(P>0.05);干预3d后,常规处理组创面面积收缩率高于空白组(P<0.01),VSD处理组创面面积收缩率高于常规处理组和空白组(P<0.01);干预7d、11d后,常规处理组创面面积收缩率高于空白组(P<0.01),VSD处理组创面面积收缩率明显高于常规处理组和空白组(P<0.01)。(3)创面组织病理学:干预1d后,各组有大量炎性细胞浸润,皮下组织水肿明显,VSD处理组炎性细胞浸润、皮下组织水肿较其余两组轻,有少量肉芽组织生长;干预3d后,各组炎性细胞浸润及皮下组织水肿有不同程度的减轻,VSD处理组与其余两组相比炎性细胞浸润及皮下组织水肿明显减轻,肉芽组织增生明显;干预7d后,可见VSD处理组炎性细胞浸润、皮下组织水肿程度明显低于其余两组,大量肉芽组织增生,胶原纤维沉积,逐渐修复、填补创面;干预11d后,空白组大量肉芽组织增生,仍有炎性细胞浸润,常规处理组有大量肉芽组织增生并玻璃样变性,VSD处理组皮肤组织缺损明显修复,皮下见大量胶原纤维增生,瘢痕形成,皮肤附属器结构增多。(4)创面组织细菌含量:干预1d、3d、7d、11d后常规处理组创面组织的细菌含量低于空白组(P<0.01),VSD处理组创面组织细菌含量均明显低于常规处理组和空白组,差异具有统计学意义(P<0.01)。(5)血清中NOS、SOD含量:(1)干预1d、3d、7d、11d后,常规处理组的NOS含量低于空白组(P<0.01),VSD处理组的NOS含量明显低于常规处理组和空白组(P<0.01);(2)干预1d、3d、7d、11d后,常规处理组的SOD含量高于空白组(P<0.01),VSD处理组的SOD含量明显高于常规处理组和空白组(P<0.01)。(6)创面组织CD34、表达及MVD、VEGF的表达及MOD:(1)干预1d、3d、7d、11d后,各组CD34的阳性表达呈逐渐增多趋势,且VSD处理组>常规处理组>空白组;常规处理组MVD高于空白组(P<0.01),VSD处理组MVD高于常规处理组和空白组(P<0.01)。(2)创干预1d、3d、7d、11d后,各组VEGF的阳性表达程度逐渐增强,且VSD处理组>常规处理组>空白组;常规处理组VEGF表达的MOD高于空白组(P<0.01),VSD处理组VEGF表达的MOD高于常规处理组和空白组(P<0.01)。结论:VSD治疗豚鼠3期压疮,能促进压疮创面愈合,提高创面面积收缩率,减轻创面组织病理学损伤,抑制创面组织细菌的生长,减少创面炎性反应。其作用机制可能与VSD降低创面组织NOS活性、提高创面组织SOD活力,增强创面组织中CD34、VEGF表达有关。