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目的1、观察胃泌素和表皮生长因子体内诱导骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的分化能力。2、诱导分化的胰岛素分泌细胞胰岛素分泌情况及治疗效果。方法1、提取大鼠股骨骨髓间充质干细胞体外培养传代。对传至第3代细胞用流式细胞仪进行分析鉴定是否为骨髓间充质干细胞,用BrdU标记第3代骨髓间充质干细胞待回输进行体内诱导。2、将32只wistar大鼠随机分为正常组、糖尿病组、干细胞回输组和干细胞回输并诱导组4组,每组8只。后三组大鼠一次性腹腔注射2%STZ(50mg/kg)建立糖尿病模型。3、血糖稳定后回输组及回输诱导组体内回输第3代骨髓间充质干细胞,同时回输诱导组开始腹腔注射3ug/mlGastrin(3ug/kg.d)和3ug/mlEGF(1ug/kg.d),连续14天,正常组和糖尿病组及回输组同时腹腔注射相当剂量的生理盐水。给药结束后观察2周后处死。4、实验过程中每周测体重,每2周测一次血糖,给药前和实验终止时各取血测空腹胰岛素一次,实验终止时10%水和氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉大鼠,取肝脏、脾脏、胰腺用免疫组织化学检测其中BrdU/胰岛素染色双阳性细胞的表达。经图像采集分析系统对各组胰腺中胰岛素染色阳性细胞区域占胰岛区域百分比进行分析。结果1、流式细胞仪检测结果培养的BM-MSCs表达CD29、CD44阳性,CD34、CD45阴性。2、生化检测结果给药前糖尿病组、干细胞回输组、回输诱导组血糖、胰岛素无明显差异。给药结束后回输组和回输并诱导组血糖均高于正常组(P＜0.01),但回输诱导组较糖尿病组下降(P＜0.01),实验终止时回输并诱导组血糖明显低于糖尿病组(P＜0.01),但仍高于正常组;胰岛素明显高于糖尿病组(P＜0.01),低于正常组。回输组血糖和胰岛素与糖尿病组无明显差异。3、免疫组织化学及图像分析结果实验终止时免疫组织化学检测胰腺中胰岛素阳性细胞百分比发现正常组明显高于其他各组(P＜0.01),回输并诱导组低于正常组但是明显高于糖尿病组和回输组(P＜0.01),而回输组与糖尿病组无显著性差异(P＞0.05)。在回输并诱导组胰腺及肝脏中发现BrdU染色/胰岛素染色双阳性细胞的表达,但脾脏中没有发现表达。其他各组肝脏脾脏中均没有BrdU染色/胰岛素染色双阳性细胞的表达。结论1、胃泌素联合表皮生长因子可以将骨髓间充质干细胞体内诱导分化为胰岛素分泌细胞。2、由骨髓间充质干细胞分化而来的胰岛素分泌细胞对大鼠糖尿病有一定的治疗作用。